১. প্রয়োজনীয় সংখ্যক মাইক্রোওয়েলের হিসাব করুন। অবশিষ্ট মাইক্রোওয়েলগুলি সরিয়ে ফেলুন এবং ডেসিট্যান্ট সহ পুনরায় সিল করা প্লাস্টিকের ব্যাগে রাখুন, সিল করুন এবং পরে ব্যবহারের জন্য ২-৮°C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করুন।
২. ক্যালিব্রেটর এবং নমুনা যোগ করুন:
২. ১ ব্ল্যাঙ্ক ওয়েল: বিকারক যোগ করবেন না।
২. ২ ক্যালিব্রেটর ওয়েল: নির্দিষ্ট নিয়ন্ত্রণ ওয়েলে ১০০ µL ক্যালিব্রেটর যোগ করুন।
২.৩ টেস্ট ওয়েল: টেস্ট ওয়েলে ১০ µL নমুনা ডাইলুয়েন্ট যোগ করুন, তারপর সংশ্লিষ্ট ওয়েলে ১০ µL নমুনা যোগ করুন।
২.৪ প্লেটটি ২০ সেকেন্ডের জন্য আলতো করে ঝাঁকান, এবং তারপর প্লেটটি সিলার দিয়ে ঢেকে দিন।
৩. ইনকিউবেট করুন: প্লেটটি ৩৭°C তাপমাত্রায় ৩০ মিনিটের জন্য ইনকিউবেট করুন।
৪. ওয়াশ ধাপ (ম্যানুয়ালি বা স্বয়ংক্রিয় ওয়াশিংয়ের মাধ্যমে করা যেতে পারে):
ম্যানুয়াল ওয়াশিং: ইনকিউবেশন মিশ্রণটি সাবধানে একটি বর্জ্য পাত্রে দ্রবণ ফেলে দিয়ে সরিয়ে ফেলুন। প্রতিটি
ওয়েলে ৩৫০ µL পাতলা ওয়াশ বাফার দিয়ে পূরণ করুন এবং ২০-৩০ সেকেন্ডের জন্য আলতো করে ঝাঁকান। ওয়াশ দ্রবণটি সম্পূর্ণরূপে ফেলে দিন। আরও ৪ বার পুনরাবৃত্তি করুন। শেষ ওয়াশ ধাপ সম্পন্ন করার পর, অবশিষ্ট তরল অপসারণের জন্য অ্যাবসর্বেন্ট কাগজের উপর প্লেটটি ট্যাপ করুন।
স্বয়ংক্রিয় ওয়াশিং: স্বয়ংক্রিয় প্লেট ওয়াশারকে কার্যকর ওয়াশিং নিশ্চিত করার জন্য ক্যালিব্রেট করতে হবে। প্রতিটি ওয়েল ৩৫০ µL দিয়ে পূরণ করুন
পাতলা ওয়াশ বাফার এবং ২০-৩০ সেকেন্ডের জন্য ভিজিয়ে রাখুন। সমস্ত ওয়েল সম্পূর্ণরূপে অ্যাসপিরেট করুন। আরও ৪ বার পুনরাবৃত্তি করুন।
৫. কনজুগেট: ব্ল্যাঙ্ক ওয়েল ছাড়া প্রতিটি ওয়েলে ১০০ µL কনজুগেট যোগ করুন।
৬. ইনকিউবেট করুন: ওয়েলগুলি ঢেকে দিন এবং ৩৭°C তাপমাত্রায় ৩০ মিনিটের জন্য ইনকিউবেট করুন।
৭. ওয়াশ ধাপ: ধাপ ৪-এ বর্ণিত হিসাবে প্লেটটি ৫ বার ওয়াশ করুন।
৮. সাবস্ট্রেট: প্রতিটি ওয়েলে, ব্ল্যাঙ্ক ওয়েল সহ, ৫০ µL সাবস্ট্রেট A এবং ৫০ µL সাবস্ট্রেট B যোগ করুন। মাইক্রোওয়েলগুলি আলতো করে ঝাঁকান
২০ সেকেন্ডের জন্য। ১৫ মিনিটের জন্য ৩৭°C তাপমাত্রায় অন্ধকারে ইনকিউবেট করুন।
৯. স্টপ সলিউশন: প্রতিটি ওয়েলে ৫০ µL স্টপ সলিউশন যোগ করুন। পজিটিভ নমুনার ওয়েলে একটি হলুদ রঙ তৈরি হওয়া উচিত।
১০. ফলাফল পড়ুন: ৩০ মিনিটের মধ্যে ৪৫০/৬৩০০-৭০০ nm এ পড়ুন।
১. দ্রষ্টব্য: মাইক্রোপ্লেটটি ৪৫০ nm এও পড়া যেতে পারে, তবে ভাল ফলাফলের জন্য ৪৫০/৬৩০০-৭০০ nm এ পড়ার জন্য এটি অত্যন্ত সুপারিশ করা হয়।
ফলাফলের ব্যাখ্যা
ক্রোনোমেট্রি: মাইক্রো প্লেট রিডার দিয়ে ৪৫০nm এ নমুনার অপটিক্যাল ডেনসিটি (OD) পড়ুন।
গড় নেগেটিভ কন্ট্রোল OD মান ≤ ০.১ এবং গড় পজিটিভ কন্ট্রোল OD মান ≥ ০.৮ হলে, পরীক্ষাটি বৈধ,
আপনার বার্তাটি 20-3,000 টির মধ্যে হতে হবে!
Bengali
