এলিসা এলএইচ টেস্ট স্ট্রিপ ISO13485 লুটেইনাইজিং হরমোন টেস্ট কিট 96 পিসি

এলএইচ এলিসা কিট লুটিনাইজিং হরমোন

1. উদ্দেশ্য ব্যবহার

মানুষের সিরামে লুটিনাইজিং হরমোনের ইন ভিট্রো পরিমাণগত নির্ধারণের জন্য ইমিউনোসে।

2. সারাংশ

• এলএইচ (লুটিনাইজিং হরমোন), এফএসএইচ (ফলিকল স্টিমুলেটিং হরমোন) এর সাথে, গোনাডোট্রপিন পরিবারের অন্তর্গত।এলএইচ এবং এফএসএইচ বৃদ্ধি নিয়ন্ত্রণ করে এবং উদ্দীপিত করে এবং গোনাডের কাজ (ডিম্বাশয় এবং অণ্ডকোষ) synergistically.যেমন FSH, TSH এবং hCG, LH হল একটি গ্লাইকোপ্রোটিন যা দুটি সাবুনিট (α- এবং β-চেইন) নিয়ে গঠিত।(1, 2, 3) এই প্রোটিওহরমোন, যা 121টি অ্যামিনো অ্যাসিড এবং তিনটি চিনির চেইন নিয়ে গঠিত, এর আণবিক ওজন 29500 ডাল্টন।মহিলাদের ক্ষেত্রে, গোনাডোট্রপিন হাইপোথ্যালামাস-পিটুইটারি-ডিম্বাশয়ের নিয়ন্ত্রক সার্কিটের মধ্যে কাজ করে মাসিক চক্র নিয়ন্ত্রণ করে।
• এলএইচ এবং এফএসএইচ অগ্রবর্তী পিটুইটারির গোনাডোট্রপিক কোষ থেকে ডালে নির্গত হয় এবং রক্তপ্রবাহের মাধ্যমে ডিম্বাশয়ে যায়।এখানে গোনাডোট্রপিনগুলি ফলিকলের বৃদ্ধি এবং পরিপক্কতাকে উদ্দীপিত করে এবং তাই ইস্ট্রোজেন এবং প্রোজেস্টেরনের জৈব সংশ্লেষণ।উচ্চতম এলএইচ-ঘনত্ব মধ্য-চক্রের শিখর সময় ঘটে এবং ডিম্বস্ফোটন এবং কর্পাস লুটিয়ামের গঠন প্ররোচিত করে, যার প্রধান নিঃসরণ পণ্য হল প্রোজেস্টেরন।টেস্টিসের লেডিগ কোষে, এলএইচ টেস্টোস্টেরন উৎপাদনকে উদ্দীপিত করে।এলএইচ ঘনত্ব নির্ধারণ হাইপোথ্যালামাস-পিটুইটারি-গোনাড সিস্টেমের মধ্যে কর্মহীনতার ব্যাখ্যায় ব্যবহৃত হয়।একযোগে LH এর সংকল্প এফএসএইচ-এর সাথে নিম্নলিখিত ইঙ্গিতগুলির জন্য ব্যবহার করা হয়: ক্রোমোজোম বিকৃতি সহ জন্মগত রোগ (যেমন টার্নার সিন্ড্রোম), পলিসিস্টিক ডিম্বাশয় (পিসিও), অ্যামেনোরিয়া, মেনোপজল সিন্ড্রোম এবং সন্দেহজনক লেডিগ কোষের অপ্রতুলতার কারণগুলিকে স্পষ্ট করে৷(1, 4, 5)

3. পরীক্ষার নীতি

স্যান্ডউইচ নীতি।পরীক্ষার মোট সময়কাল: 80 মিনিট।

• নমুনা, অ্যান্টি-এলএইচ প্রলিপ্ত মাইক্রোওয়েল এবং অ্যান্টি-এলএইচ লেবেলযুক্ত এনজাইম একত্রিত হয়।

• ইনকিউবেশনের সময়, নমুনায় উপস্থিত এলএইচকে প্রতিক্রিয়া দেখানোর অনুমতি দেওয়া হয়

একই সাথে দুটি অ্যান্টিবডির সাথে, যার ফলে এলএইচ অণু হয়

কঠিন পর্যায় এবং এনজাইম-সংযুক্ত অ্যান্টিবডিগুলির মধ্যে স্যান্ডউইচ করা হয়।

• ধোয়ার পর, কঠিন ধাপ, নমুনার মধ্যে এলএইচ এবং ইমিউনোলজিক্যাল প্রতিক্রিয়া দ্বারা এনজাইম-সংযুক্ত অ্যান্টিবডিগুলির মধ্যে একটি কমপ্লেক্স তৈরি হয়।

• এই কমপ্লেক্স দ্বারা সাবস্ট্রেট দ্রবণ যোগ করা হয় এবং অনুঘটক করা হয়, যার ফলে একটি ক্রোমোজেনিক বিক্রিয়া হয়।ফলস্বরূপ ক্রোমোজেনিক প্রতিক্রিয়া শোষণ হিসাবে পরিমাপ করা হয়।

• শোষণ নমুনায় এলএইচের পরিমাণের সমানুপাতিক।

বিকারক

উপকরণ প্রদান করা হয়েছে

• প্রলিপ্ত মাইক্রোপ্লেট, 8 x 12 স্ট্রিপ, 96 কূপ, মাউস মনোক্লোনাল সহ প্রি-কোটেড

এলএইচ-বিরোধী।

• ক্যালিব্রেটর, 6টি শিশি, প্রতিটি 1 মিলি, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত;ঘনত্ব: 0(A), 5(B), 20(C), 50(D), 100(E) এবং 200(F) mIU/mL।

• এনজাইম কনজুগেট, 1 শিশি, BSA (বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন) ধারণকারী Tris-NaCl বাফারে HRP (হর্সরাডিশ পারক্সিডেস) লেবেলযুক্ত মাউস মনোক্লোনাল অ্যান্টি-এলএইচের 11 মিলি।0.1% ProClin300 প্রিজারভেটিভ রয়েছে।

• সাবস্ট্রেট, 1 শিশি, 11ml, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত, (tetramethylbenzidine) TMB।

• স্টপ সলিউশন, 1 শিশি, 1 mol/L সালফিউরিক অ্যাসিডের 6.0 মিলি।

• ধোয়ার সমাধান ঘনীভূত, 1 শিশি, 25 মিলি (40X ঘনীভূত), পিবিএস-টুইন

সমাধান ধোয়া।

• IFU, 1 কপি।

• প্লেট ঢাকনা: 1 টুকরা।

প্রয়োজনীয় উপকরণ (কিন্তু প্রদান করা হয়নি)

• 450nm এবং 620nm তরঙ্গদৈর্ঘ্য শোষণ ক্ষমতা সহ মাইক্রোপ্লেট রিডার।

• মাইক্রোপ্লেট ওয়াশার।

• ইনকিউবেটর

4. পরীক্ষা পদ্ধতি

• শুধুমাত্র প্রয়োজনীয় কূপের সংখ্যা ব্যবহার করুন এবং মাইক্রোপ্লেটের কূপগুলি ফরম্যাট করুন

প্রতিটি ক্যালিব্রেটর এবং নমুনা পরীক্ষা করা হবে।

• প্রতিটি কূপে 25 μL ক্যালিব্রেটর বা নমুনা যোগ করুন।

• প্রতিটি কূপে 100 μL এনজাইম কনজুগেট যোগ করুন।

• মিশ্রিত করার জন্য মাইক্রোপ্লেটটি 30 সেকেন্ডের জন্য আলতোভাবে ঝাঁকান।

• প্লেটটিকে একটি প্লেটের ঢাকনা দিয়ে ঢেকে রাখুন এবং 60 মিনিটের জন্য 37 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় ইনকিউবেট করুন।

• ডিক্যান্টেশন বা আকাঙ্খা দ্বারা মাইক্রো প্লেটের বিষয়বস্তু বাদ দিন।যদি

শোষণকারী কাগজ দিয়ে প্লেটটি শুকিয়ে, আলতো চাপুন এবং ব্লট করুন।

• 350 μL ওয়াশ সলিউশন, ডিক্যান্ট (ট্যাপ এবং ব্লট) বা অ্যাসপিরেট যোগ করুন।মোট 5টি ধোয়ার জন্য 4 অতিরিক্ত বার পুনরাবৃত্তি করুন।একটি স্বয়ংক্রিয় মাইক্রোপ্লেট স্ট্রিপ ওয়াশার ব্যবহার করা যেতে পারে।ধোয়ার শেষে, প্লেটটি উল্টে দিন এবং শোষক কাগজের উপর যেকোন অবশিষ্ট ধোয়ার দ্রবণটি আলতো চাপুন।

• প্রতিটি কূপে 100 μL সাবস্ট্রেট যোগ করুন।

• 20 মিনিটের জন্য প্রতিক্রিয়ার জন্য অন্ধকারে পরিবেষ্টিত তাপমাত্রায় (18-25℃) ইনকিউবেট করুন।সাবস্টেট যোগ করার পরে প্লেট ঝাঁকান না।

• প্রতিটি কূপে 50 μl স্টপ দ্রবণ যোগ করুন।

• কূপের মধ্যে তরল মেশানোর জন্য 15-20 সেকেন্ডের জন্য ঝাঁকান।এটা গুরুত্বপূর্ণ

নিশ্চিত করুন যে নীল রঙ সম্পূর্ণরূপে হলুদে পরিবর্তিত হয়।

• প্রতিটি কূপের শোষণ 450 এনএম পড়ুন (620 থেকে 630 এনএম ব্যবহার করে

একটি মাইক্রো প্লেট রিডারে ভাল অসম্পূর্ণতা কমাতে রেফারেন্স তরঙ্গদৈর্ঘ্য)।