১. প্রয়োজনীয় মাইক্রোওয়েলের সংখ্যা গণনা করুন। অবশিষ্ট মাইক্রোওয়েলগুলি সরিয়ে ফেলুন এবং ডেসিট্যান্ট সহ পুনরায় সিল করা প্লাস্টিকের ব্যাগে রাখুন, সিল করুন এবং পরে ব্যবহারের জন্য ২-৮°C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করুন।
২. ক্যালিব্রেটর এবং নমুনা যোগ করুন:
২. ১ ব্ল্যাঙ্ক ওয়েল: বিকারক যোগ করবেন না।
২. ২ ক্যালিব্রেটর ওয়েল: নির্দিষ্ট নিয়ন্ত্রণ কূপগুলিতে ১০০ µL ক্যালিব্রেটর যোগ করুন।
২.৩ টেস্ট ওয়েল: টেস্ট ওয়েলগুলিতে ১০০ µL নমুনা ডাইলুয়েন্ট যোগ করুন, তারপর সংশ্লিষ্ট ওয়েলে ১০ µL নমুনা যোগ করুন।
২.৪ প্লেটটি আলতো করে ২০ সেকেন্ড ঝাঁকান, তারপর প্লেটটি সিলার দিয়ে ঢেকে দিন।
৩. ইনকিউবেট করুন: প্লেটটি ৩৭°C তাপমাত্রায় ৩০ মিনিটের জন্য ইনকিউবেট করুন।
৪. ওয়াশ ধাপ (ম্যানুয়ালি বা স্বয়ংক্রিয় ওয়াশিং দিয়ে করা যেতে পারে):
ম্যানুয়াল ওয়াশিং: বর্জ্য পাত্রে দ্রবণ ফেলে ইনকিউবেশন মিশ্রণটি সাবধানে সরিয়ে ফেলুন। প্রতিটি
ওয়েলে ৩৫০ µL পাতলা ওয়াশ বাফার দিয়ে পূরণ করুন এবং ২০-৩০ সেকেন্ড আলতো করে ঝাঁকান। ওয়াশ দ্রবণটি সম্পূর্ণরূপে ফেলে দিন। আরও ৪ বার পুনরাবৃত্তি করুন। শেষ ওয়াশ ধাপ সম্পন্ন করার পর, অবশিষ্ট তরল অপসারণের জন্য শোষণকারী কাগজের উপর প্লেটটি ট্যাপ করুন।
স্বয়ংক্রিয় ওয়াশিং: কার্যকর ওয়াশিং নিশ্চিত করার জন্য স্বয়ংক্রিয় প্লেট ওয়াশারকে ক্যালিব্রেট করতে হবে। প্রতিটি ওয়েলে ৩৫০ µL
পাতলা ওয়াশ বাফার দিয়ে পূরণ করুন এবং ২০-৩০ সেকেন্ড ভিজিয়ে রাখুন। সমস্ত ওয়েল সম্পূর্ণরূপে অ্যাসপিরেট করুন। আরও ৪ বার পুনরাবৃত্তি করুন।
৫. কনজুগেট: ব্ল্যাঙ্ক ওয়েল ছাড়া প্রতিটি ওয়েলে ১০০ µL কনজুগেট যোগ করুন।
৬. ইনকিউবেট করুন: ওয়েলগুলি ঢেকে দিন এবং ৩৭°C তাপমাত্রায় ৩০ মিনিটের জন্য ইনকিউবেট করুন।
৭. ওয়াশ ধাপ: ধাপ ৪-এ বর্ণিত হিসাবে প্লেটটি ৫ বার ওয়াশ করুন।
৮. সাবস্ট্রেট: প্রতিটি ওয়েলে, ব্ল্যাঙ্ক ওয়েল সহ, ৫০ µL সাবস্ট্রেট A এবং ৫০ µL সাবস্ট্রেট B যোগ করুন। মাইক্রোওয়েলগুলি ২০ সেকেন্ড আলতো করে ঝাঁকান। ১৫ মিনিটের জন্য ৩৭°C তাপমাত্রায় অন্ধকারে ইনকিউবেট করুন।
৯. স্টপ সলিউশন: প্রতিটি ওয়েলে ৫০ µL স্টপ সলিউশন যোগ করুন। পজিটিভ নমুনাযুক্ত ওয়েলগুলিতে একটি হলুদ রঙ তৈরি হওয়া উচিত।
১০. ফলাফল পড়ুন: ৩০ মিনিটের মধ্যে ৪৫০/৬৩০০-৭০০ nm এ পড়ুন।
১. দ্রষ্টব্য: মাইক্রোপ্লেটটি ৪৫০ nm এও পড়া যেতে পারে, তবে ভাল ফলাফলের জন্য এটি ৪৫০/৬৩০০-৭০০ nm এ পড়ার জন্য দৃঢ়ভাবে সুপারিশ করা হয়।
ফলাফলের ব্যাখ্যা
ক্রোনোমেট্রি: মাইক্রো প্লেট রিডার দিয়ে ৪৫০nm এ নমুনার অপটিক্যাল ডেনসিটি (OD) পড়ুন।
গড় নেগেটিভ কন্ট্রোল OD মান ≤ ০.১ এবং গড় পজিটিভ কন্ট্রোল OD মান ≥ ০.৮ হলে, পরীক্ষাটি বৈধ, অন্যথায় পরীক্ষাটি অবৈধ।
কাট-অফ মান (C.O.) = নেগেটিভ কন্ট্রোলের গড় OD মান x ৩ (০.১০ দ্বারা গণনা করা হয় যখন গড়
পজিটিভ ফলাফল: নমুনা OD মান ≥ C.O.
আপনার বার্তাটি 20-3,000 টির মধ্যে হতে হবে!
Bengali
