• রিএজেন্ট প্রস্তুত করুনঃ 19 ভলিউম নিষ্কাশিত পানি দিয়ে 1 ভলিউম কনসেন্ট্রেটেড ওয়াশিং বাফার (20 ×) দ্রবীভূত করুন, ভালভাবে মিশ্রিত করুন।
• নমুনা যোগ করুনঃ ফয়েল পকেট খুলুন এবং মাইক্রোপ্লেটটি সরান। 1 টি ভাল খালি হিসাবে, 2 টি ভাল নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে, 2 টি ভাল ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে সেট করুন। 50μL নমুনা দ্রাবক বিতরণ করার পরে, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা দ্রাবক, 50μL নমুনা50μL নমুনা বা নেগেটিভ কন্ট্রোল বা পজিটিভ কন্ট্রোলকে সংশ্লিষ্ট কূপগুলিতে বিতরণ করুন- পাতলাভাবে প্লেট কম্পন।
• ইনকিউবেট করুনঃ মাইক্রোপ্লেটকে প্লেট কভার দিয়ে ঢেকে রাখুন এবং থার্মোস্ট্যাট নিয়ন্ত্রিত ওয়াটার-বাথ বা মাইক্রোপ্লেট ইনকিউবেটরে 60 মিনিটের জন্য 37°C এ ইনকিউবেট করুন।
• প্লেটটি ধুয়ে ফেলুনঃ প্লেটের কভারটি সরিয়ে ফেলুন। সমস্ত কূপের সামগ্রীটি উত্তোলন করুন। দ্রবীভূত ওয়াশিং বাফার দিয়ে কূপগুলি পূরণ করুন (অনুমোদনের জন্য 10 ~ 20 সেকেন্ড) তারপরে আবার উত্তোলন করুন।পদ্ধতিটি 5 বার পুনরাবৃত্তি করুন. শোষণকারী কাগজের উপর প্লেট ট্যাপ করে বিশ্রামের পরিমাণ ন্যূনতম নিশ্চিত করুন।
• কনজিউগেট যোগ করুনঃ প্রতিটি কূপে 100μL কনজিউগেট যোগ করুন (খালি কূপ ছাড়া) ।
• ইনকিউবেট করুনঃ মাইক্রোপ্লেটটি ঢেকে রাখুন এবং 30 মিনিটের জন্য 37°C এ ইনকিউবেট করুন।
• প্লেটটি ধুয়ে ফেলুনঃ ধোয়া পদ্ধতিটি ধাপ ৪ এর মতো পুনরাবৃত্তি করুন।
• Substrate যোগ করুনঃ প্রতিটি কূপে Substrate Solution A এর 50μL এবং Substrate Solution B এর 50μL যোগ করুন, ভালভাবে মিশ্রিত করুন। কভার করুন এবং 30 মিনিটের জন্য 37°C এ ইনকিউবেট করুন।
• স্টপ রেঅ্যাকশনঃ প্রতিটি কুয়োতে 50μL স্টপ সলিউশন যোগ করুন, ভালভাবে মিশ্রিত করুন।
• 450 এনএম এ শোষণযোগ্যতা পড়ুন। যদি একটি দ্বৈত তরঙ্গদৈর্ঘ্যের পরিমাপ ব্যবহার করা হয়, তাহলে রেফারেন্স তরঙ্গদৈর্ঘ্য 620nm থেকে 690nm মধ্যে নির্বাচন করা উচিত।

সাবধানতা

• ব্যবহারের আগে সমস্ত কিট উপাদানকে ঘরের তাপমাত্রায় পৌঁছানোর অনুমতি দিন।
• প্রতিক্রিয়া তাপমাত্রা এবং সময় কঠোরভাবে নিয়ন্ত্রণ করার জন্য নির্দেশাবলী সন্নিবেশ অনুসরণ করুন।
• বিভিন্ন লট নাম্বারের উপাদান মিশ্রিত করবেন না।
• কিটটি 2- 8°C এ সংরক্ষণ করা উচিত। কিট উপাদানগুলি তাদের মেয়াদ শেষ হওয়ার তারিখের পরে ব্যবহার করবেন না।