বায়োভ্যানশন অ্যান্টি থাইরোগ্লোবুলিন অ্যান্টিবডি টেস্ট অ্যান্টি টিজি অ্যাব টেস্ট কিট

অ্যান্টি-টিজি এলিসা টেস্ট কিট থাইরোগ্লোবুলিন আব

1. উদ্দেশ্য ব্যবহার

হিউম্যান সিরামে থাইরোগ্লোবুলিনের অ্যান্টিবডির ইন ভিট্রো পরিমাণগত নির্ধারণের জন্য ইমিউনোসাই।অ্যান্টি-টিজি নির্ধারণ অটোইমিউন থাইরয়েড রোগ সনাক্তকরণে সহায়তা হিসাবে ব্যবহৃত হয়।

2. সারাংশ

থাইরোগ্লোবুলিন (টিজি) থাইরয়েড গ্রন্থিতে উত্পাদিত হয় এবং এটি থাইরয়েড ফলিকলের লুমেনের একটি প্রধান উপাদান।থাইরয়েড-নির্দিষ্ট পারক্সিডেস (TPO) এনজাইমের সাথে সমন্বয় করে, Tg-এর L-tyrosine আয়োডিনেশন এবং থাইরয়েড হরমোন T4 এবং T3 গঠনে একটি অপরিহার্য কাজ রয়েছে।Tg এবং TPO উভয়ই সম্ভাব্য অটোএন্টিজেনিক।

অটোইমিউনিটি-ভিত্তিক থাইরয়েডাইটিস রোগীদের মধ্যে Tg (Tg-অটোঅ্যান্টিবডি) এর বিরুদ্ধে অ্যান্টিবডিগুলির উচ্চতর সিরাম ঘনত্ব পাওয়া যায়।অ্যান্টি-টিপিও-এর সাথে অ্যান্টি-টিজি-এর উচ্চ ঘনত্ব দীর্ঘস্থায়ী লিম্ফোসাইটিক-অনুপ্রবেশকারী থাইরয়েডাইটিস (হাশিমোটো রোগ) এর নির্দেশক।থাইরোগ্লোবুলিন অ্যান্টিবডির ফ্রিকোয়েন্সি প্রায় 70-80% অটোইমিউন-থাইরয়েডাইটিস সহ হাশিমোটো ডিজিজ এবং প্রায় 30% গ্রেভস রোগে আক্রান্ত ব্যক্তিদের মধ্যে। অ্যান্টি-টিজি অ্যাস হাশিমোটোইডাইটিসের কোর্স নিরীক্ষণের জন্য গুরুত্বপূর্ণ। ডিফারেনশিয়াল ডায়াগনোসিসের জন্য (নেতিবাচক অ্যান্টি-টিপিও পরীক্ষার ফলাফল সহ অজানা উত্সের সন্দেহজনক অটোইমিউন থাইরয়েডাইটিসের ক্ষেত্রে, লিম্ফোসাইটিক অনুপ্রবেশ ছাড়াই গ্রেভস রোগ, এবং টিজি পরীক্ষায় টিজি-অটোঅ্যান্টিবডিগুলির হস্তক্ষেপ বাতিল করার জন্য)।

যদিও একই সাথে অতিরিক্ত থাইরয়েড অ্যান্টিবডি (অ্যান্টি-টিপিও, টিএসএইচ-রিসেপ্টর-অ্যান্টিবডি) নির্ধারণ করে পদ্ধতির সংবেদনশীলতা বৃদ্ধি করা যেতে পারে, তবে একটি নেতিবাচক ফলাফল একটি অটোইমিউন রোগের উপস্থিতি নিশ্চিতভাবে অস্বীকার করে না।অ্যান্টিবডি টাইটারের স্তর রোগের ক্লিনিকাল কার্যকলাপের সাথে সম্পর্কযুক্ত নয়।যে টাইটারগুলি প্রাথমিকভাবে উন্নীত হয় তা নেতিবাচক হতে পারে যদি রোগটি দীর্ঘ সময়ের জন্য বা যদি থাকে

মওকুফ ঘটে।যদি অ্যান্টিবডিগুলি মওকুফের পরে পুনরায় আবির্ভূত হয়, তবে পুনরায় সংক্রমণের সম্ভাবনা রয়েছে।

এনজাইম যুক্ত ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাসেস মানব অ্যান্টিজেন এবং খরগোশের অ্যান্টি-হিউম্যান আইজিজি অ্যান্টিবডি (এন্টি-আইজিজি) ব্যবহার করে।

3. রিএজেন্ট উপাদান প্রদান করা হয়

• প্রলিপ্ত মাইক্রোপ্লেট, 8 x 12 স্ট্রিপ, 96 টি কূপ।মানুষের টিজি অ্যান্টিজেনের সাথে প্রাক-প্রলিপ্ত।

• ক্যালিব্রেটর, 6টি শিশি, 1 এমএল প্রতিটি, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত;ঘনত্ব: 0(A), 50(B) ,150(C), 500(D), 1000(E) এবং 2000(F) IU/mL।

• এনজাইম কনজুগেট, 1 শিশি, BSA (বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন) ধারণকারী Tris-NaCl বাফারে খরগোশ-বিরোধী-মানবীয় IgG অ্যান্টিবডি (অ্যান্টি-আইজিজি) লেবেলযুক্ত HRP-এর 11.0 mL।0.1% ProClin300 প্রিজারভেটিভ রয়েছে।

• সিরাম ডাইলুয়েন্ট: 1 শিশি, 11 মিলি।বাফার সল্ট এবং একটি রঞ্জক ধারণকারী

• ওয়াশ সলিউশন কনসেনট্রেট, 1 শিশি, 25 মিলি (40X ঘনীভূত), পিবিএস-টুইন ওয়াশ দ্রবণ।

• সাবস্ট্রেট, 1 শিশি, 11ml, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত, (tetramethylbenzidine) TMB।

• স্টপ সলিউশন, 1 শিশি, 1 mol/l সালফিউরিক অ্যাসিডের 6.0 মিলি।

• IFU, 1 কপি।

• প্লেট ঢাকনা: 2 টুকরা।

4. প্রয়োজনীয় উপকরণ (কিন্তু প্রদান করা হয়নি)

• 450nm এবং 620nm তরঙ্গদৈর্ঘ্য শোষণ ক্ষমতা সহ মাইক্রোপ্লেট রিডার।
• মাইক্রোপ্লেট ওয়াশার।
• ইনকিউবেটর।
• প্লেট শেকার।
• মাইক্রোপিপেটস এবং মাল্টিচ্যানেল মাইক্রোপিপেট 1.5% এর চেয়ে ভাল নির্ভুলতার সাথে 50µl সরবরাহ করে।
• শোষক কাগজ।
• বিশুদ্ধ পানি

5. পরীক্ষা পদ্ধতি

• শুধুমাত্র প্রয়োজনীয় কূপের সংখ্যা ব্যবহার করুন এবং প্রতিটি ক্যালিব্রেটর এবং নমুনা পরীক্ষা করার জন্য মাইক্রোপ্লেট কূপগুলি ফর্ম্যাট করুন।

• প্রতিটি কূপে 100 μL ক্যালিব্রেটর যোগ করুন।

• ক্যালিব্রেটর-কূপ ব্যতীত প্রতিটি কূপে 100 μL নমুনা পাতলা (সবুজ রঙ) যোগ করুন।

• প্রতিটি স্যাম্পল ডিলুয়েন্ট কূপে 10 µL নমুনা যোগ করুন (দ্রষ্টব্য: ওয়েলস-এর রিএজেন্টগুলি সবুজ থেকে নীল রঙে পরিণত হবে), তারপর 30 সেকেন্ড ঝাঁকান।

• একটি প্লেট ঢাকনা দিয়ে প্লেটটি ঢেকে রাখুন এবং 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 30 মিনিটের জন্য জ্বাল দিন।

• ডিক্যান্টেশন বা অ্যাসপিরেশন দ্বারা মাইক্রো প্লেটের বিষয়বস্তু বাদ দিন।ডিক্যান্টিং হলে, শোষক কাগজ দিয়ে প্লেটটি শুকিয়ে ট্যাপ করুন এবং ব্লট করুন।

• 350 μL ওয়াশ সলিউশন, ডিক্যান্ট (ট্যাপ এবং ব্লট) বা অ্যাসপিরেট যোগ করুন।মোট 5টি ধোয়ার জন্য 4 অতিরিক্ত বার পুনরাবৃত্তি করুন।ধোয়ার শেষে, প্লেটটি উল্টে দিন এবং শোষক কাগজের উপর যেকোন অবশিষ্ট ধোয়ার দ্রবণটি আলতো চাপুন।

• 100 μL এনজাইম কনজুগেট যোগ করুন,

• একটি প্লেট ঢাকনা দিয়ে প্লেটটি ঢেকে রাখুন এবং 37 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় 30 মিনিটের জন্য সেঁকুন

• 350 μL ওয়াশ সলিউশন, ডিক্যান্ট (ট্যাপ এবং ব্লট) বা অ্যাসপিরেট যোগ করুন।মোট 5টি ধোয়ার জন্য 4 অতিরিক্ত বার পুনরাবৃত্তি করুন।ধোয়ার শেষে, প্লেটটি উল্টে দিন এবং শোষক কাগজের উপর যেকোন অবশিষ্ট ধোয়ার দ্রবণটি আলতো চাপুন।

• প্রতিটি কূপে 100 μL সাবস্ট্রেট যোগ করুন।10 মিনিটের জন্য প্রতিক্রিয়ার জন্য অন্ধকারে পরিবেষ্টিত তাপমাত্রায় (18-25℃) ঢেকে রাখুন।সাবস্টেট যোগ করার পরে প্লেট ঝাঁকান না।

• প্রতিটি কূপে 50 μL স্টপ দ্রবণ যোগ করুন।

• কূপের মধ্যে তরল মেশানোর জন্য 15-20 সেকেন্ডের জন্য ঝাঁকান।এটি নিশ্চিত করা গুরুত্বপূর্ণ যে নীল রঙ সম্পূর্ণরূপে হলুদে পরিবর্তিত হয়।

• একটি মাইক্রো প্লেট রিডারে প্রতিটি কূপের শোষণ 450 এনএম ( রেফারেন্স তরঙ্গদৈর্ঘ্য হিসাবে 620 থেকে 630 এনএম ব্যবহার করে ভাল অসম্পূর্ণতা কমাতে) পড়ুন।স্টপ সমাধান যোগ করার 30 মিনিটের মধ্যে ফলাফল পড়া উচিত।