ISO থাইরক্সিন T4 এলিসা টেস্ট ফ্রি T4 সিরাম টেস্ট 110 মিনিট পড়ার সময়

T4 থাইরক্সিন
REF: DS177703 96 পরীক্ষা

1. উদ্দেশ্য ব্যবহার
মানুষের সিরামে থাইরক্সিনের ইন ভিট্রো পরিমাণগত নির্ধারণের জন্য ইমিউনোসাই।

2. সারাংশ
থাইরক্সিন (T4) হরমোন থাইরয়েড গ্রন্থি দ্বারা নিঃসৃত প্রধান পণ্য এবং এটি হাইপোথ্যালামাস-অ্যান্টেরিয়র পিটুইটারি-থাইরয়েড নিয়ন্ত্রণ ব্যবস্থার একটি অবিচ্ছেদ্য উপাদান।এটি বিপাককে প্রভাবিত করে অ্যানাবোলিকভাবে কাজ করে।থাইরক্সিন থাইরয়েড গ্রন্থিতে দুটি ডিআইটি অণু (3,5-ডাইওডোটাইরোসিন) থেকে একটি সংযোগ বিক্রিয়ায় গঠিত হয়।এটি থাইরয়েড ফলিকলসের লুমিনায় থাইরোগ্লোবুলিনের সাথে আবদ্ধ থাকে এবং টিএসএইচ-এর প্রভাবে প্রয়োজন অনুযায়ী নিঃসৃত হয়।(1, 2) সিরামের মোট থাইরক্সিনের (T4) প্রধান অংশ (> 99%) প্রোটিন আবদ্ধ আকারে উপস্থিত।যেহেতু সিরামে পরিবহন প্রোটিনের ঘনত্ব বহিরাগত এবং অন্তঃসত্ত্বা প্রভাবের সাপেক্ষে, তাই সিরামে থাইরয়েড হরমোনের ঘনত্বের মূল্যায়নের ক্ষেত্রে বাঁধাই প্রোটিনের অবস্থাও বিবেচনায় নেওয়া উচিত।যদি এটি উপেক্ষা করা হয়, বাইন্ডিং প্রোটিনের পরিবর্তন (যেমন ইস্ট্রোজেন ধারণকারী প্রস্তুতির কারণে, গর্ভাবস্থায় বা নেফ্রোটিক সিন্ড্রোমের উপস্থিতি ইত্যাদি) থাইরয়েড বিপাকীয় অবস্থার ভুল মূল্যায়ন হতে পারে।(3, 4, 5, 6, 7) T4 এর নির্ণয় নিম্নলিখিত ইঙ্গিতগুলির জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে: হাইপারথাইরয়েডিজম সনাক্তকরণ, প্রাথমিক এবং মাধ্যমিক হাইপোথাইরয়েডিজম সনাক্তকরণ এবং টিএসএইচ-দমন থেরাপির পর্যবেক্ষণ।(8)
T4 অ্যাস বিশেষভাবে T4 এর বিরুদ্ধে নির্দেশিত একটি অ্যান্টিবডি সহ একটি প্রতিযোগিতামূলক পরীক্ষার নীতি নিয়োগ করে।এন্ডোজেনাস T4, 8-অ্যানিলিনো-1-ন্যাপথালিন সালফোনিক অ্যাসিড (ANS) এর ক্রিয়া দ্বারা মুক্তি পায়।

3. রিএজেন্ট উপাদান প্রদান করা হয়
• প্রলিপ্ত মাইক্রোপ্লেট, 8 x 12 স্ট্রিপ, 96 টি কূপ, T4 ডেরিভেন্টের সাথে প্রি-কোটেড।
• ক্যালিব্রেটর, 6টি শিশি, প্রতিটি 1 মিলি, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত;ঘনত্ব: 0(A), 2.5(B), 5(C), 10(D), 15(E) এবং 30(F) μg/dL।
• এনজাইম কনজুগেট, 1 শিশি, BSA (বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন) ধারণকারী Tris-NaCl বাফারে HRP (হর্সরাডিশ পারক্সিডেস) লেবেলযুক্ত মাউস মনোক্লোনাল T4 এর 6.0 মিলি।0.2% ProClin300 প্রিজারভেটিভ রয়েছে।ANS 1.5 mg/mL.
• সাবস্ট্রেট, 1 শিশি, 11ml, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত, (tetramethylbenzidine) TMB।
• স্টপ সলিউশন, 1 শিশি, 1 mol/l সালফিউরিক অ্যাসিডের 6.0 মিলি।
• ওয়াশ সলিউশন কনসেনট্রেট, 1 শিশি, 25 মিলি (40X ঘনীভূত), পিবিএস-টুইন ওয়াশ দ্রবণ।
• IFU, 1 কপি।
• প্লেট ঢাকনা: 1 টুকরা।

4. প্রয়োজনীয় উপকরণ (কিন্তু প্রদান করা হয়নি)
• 450nm এবং 620nm তরঙ্গদৈর্ঘ্য শোষণ ক্ষমতা সহ মাইক্রোপ্লেট রিডার।
• মাইক্রোপ্লেট ওয়াশার।
• ইনকিউবেটর।
• প্লেট শেকার.
• মাইক্রোপিপেটস এবং মাল্টিচ্যানেল মাইক্রোপিপেট 1.5% এর চেয়ে ভাল নির্ভুলতার সাথে 50μl সরবরাহ করে।
• শোষক কাগজ।
• বিশুদ্ধ পানি

পরীক্ষা পদ্ধতি

পরিমাপের আগে রোগীদের নমুনা, ক্যালিব্রেটর এবং নিয়ন্ত্রণগুলি পরিবেষ্টিত তাপমাত্রায় (18-25 ℃) নিশ্চিত করুন৷ব্যবহার করার আগে আলতোভাবে উল্টানো মাধ্যমে সমস্ত রিএজেন্ট মিশ্রিত করুন।

• শুধুমাত্র প্রয়োজনীয় কূপের সংখ্যা ব্যবহার করুন এবং প্রতিটি ক্যালিব্রেটর এবং নমুনা পরীক্ষা করার জন্য মাইক্রোপ্লেটের কূপগুলি ফর্ম্যাট করুন।• প্রতিটি কূপে 50 μL ক্যালিব্রেটর বা নমুনা যোগ করুন।

• প্রতিটি কূপে 50 μL এনজাইম কনজুগেট যোগ করুন।

• মিশ্রিত করার জন্য মাইক্রোপ্লেটটি 30 সেকেন্ডের জন্য আলতোভাবে ঝাঁকান।

• প্লেটটিকে একটি প্লেটের ঢাকনা দিয়ে ঢেকে দিন এবং 37 ℃ তাপমাত্রায় 60 মিনিটের জন্য সেঁকুন।

• ডিক্যান্টেশন বা আকাঙ্খা দ্বারা মাইক্রো প্লেটের বিষয়বস্তু বাদ দিন।ডিক্যান্টিং হলে, শোষক কাগজ দিয়ে প্লেটটি শুকিয়ে ট্যাপ করুন এবং ব্লট করুন।

• 350 μl ওয়াশ সলিউশন, ডিক্যান্ট (ট্যাপ এবং ব্লট) বা অ্যাসপিরেট যোগ করুন।মোট 5টি ধোয়ার জন্য 4 অতিরিক্ত বার পুনরাবৃত্তি করুন।একটি স্বয়ংক্রিয় মাইক্রোপ্লেট স্ট্রিপ ওয়াশার ব্যবহার করা যেতে পারে।ধোয়ার শেষে, প্লেটটি উল্টে দিন এবং শোষক কাগজের উপর যেকোন অবশিষ্ট ধোয়ার দ্রবণটি আলতো চাপুন।

• প্রতিটি কূপে 100 μL সাবস্ট্রেট যোগ করুন।

• 20 মিনিটের জন্য প্রতিক্রিয়ার জন্য অন্ধকারে পরিবেষ্টিত তাপমাত্রায় (18-25℃) ঢেকে রাখুন এবং ইনকিউবেট করুন।সাবস্টেট যোগ করার পরে প্লেট ঝাঁকান না।• প্রতিটি কূপে 50 μL স্টপ দ্রবণ যোগ করুন।

• কূপের মধ্যে তরল মেশানোর জন্য 15-20 সেকেন্ডের জন্য ঝাঁকান।এটি নিশ্চিত করা গুরুত্বপূর্ণ যে নীল রঙ সম্পূর্ণরূপে হলুদে পরিবর্তিত হয়।

• একটি মাইক্রো প্লেট রিডারে প্রতিটি কূপের শোষণ 450 এনএম ( রেফারেন্স তরঙ্গদৈর্ঘ্য হিসাবে 620 থেকে 630 এনএম ব্যবহার করে ভাল অসম্পূর্ণতা কমাতে) পড়ুন।স্টপ সমাধান যোগ করার 30 মিনিটের মধ্যে ফলাফল পড়া উচিত