থাইরোট্রপিন TSH ELISA TEST থাইরয়েড উদ্দীপক হরমোন পরীক্ষা

হট সেল টিএসএইচ এলিসা টেস্ট কিট
REF: DS177701 96 পরীক্ষা

উদ্দেশ্যে ব্যবহার
মানুষের সিরামে থাইরোট্রপিনের ইন ভিট্রো পরিমাণগত নির্ধারণের জন্য ইমিউনোসাই।

1. সারাংশ

• থাইরয়েড-উত্তেজক হরমোন (TSH, thyrotropin) হল একটি গ্লাইকোপ্রোটিন যার আণবিক ওজন প্রায়।30000 ডাল্টন এবং দুটি সাবইউনিট নিয়ে গঠিত।
• সিরাম ঘনত্বের পরিমাপ প্রায়শই থাইরোট্রপিন (টিএসএইচ), একটি গ্লাইকোপ্রোটিন যার আণবিক ওজন 28,000 ডাল্টন এবং অগ্রবর্তী পিটুইটারি থেকে নিঃসৃত হয়, সাধারণত প্রাথমিক ও মাধ্যমিক (পিটুইটারি) (পিটুইটারি) রোগ নির্ণয়ের জন্য উপলব্ধ সবচেয়ে সংবেদনশীল সূচক হিসাবে বিবেচিত হয়। 2)।
• টিএসএইচ পরিমাপ প্রাথমিক থাইরয়েড রোগ থেকে মাধ্যমিক এবং তৃতীয় (হাইপোথ্যালামিক) হাইপোথাইরয়েডিজমকে আলাদা করতে সমানভাবে কার্যকর।পিটুইটারি থেকে টিএসএইচ নিঃসরণ থাইরোট্রপিন রিলিজিং ফ্যাক্টর (টিআরএইচ) দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয়, যা হাইপোথ্যালামাস দ্বারা নিঃসৃত হয় এবং পিটুইটারিতে থাইরয়েড হরমোন T4 এবং ট্রাইওডোথাইরোনিন (T3) এর সরাসরি ক্রিয়া দ্বারা।
• T3 এবং T4 এর মাত্রা বাড়ালে TRH এর উদ্দীপক প্রভাবে পিটুইটারির প্রতিক্রিয়া কমে যায়।মাধ্যমিক এবং তৃতীয় হাইপোথাইরয়েডিজমের ক্ষেত্রে, T4 এর ঘনত্ব সাধারণত কম থাকে এবং TSH মাত্রা সাধারণত কম বা স্বাভাবিক থাকে।হয় পিটুইটারি টিএসএইচ ঘাটতি (সেকেন্ডারি হাইপোথাইরয়েডিজম) বা TRH (টারশিয়ারি হাইপোথাইরয়েডিজম) দ্বারা পিটুইটারির উদ্দীপনার অপর্যাপ্ততা এটি ঘটায়।
• TRH উদ্দীপনা পরীক্ষা এই শর্তগুলিকে আলাদা করে।সেকেন্ডারি হাইপোথাইরয়েডিজমের ক্ষেত্রে, TRH-এর প্রতি TSH প্রতিক্রিয়া ভোঁতা হয়ে যায় যখন তৃতীয় হাইপোথাইরয়েডিজমের ক্ষেত্রে স্বাভাবিক বা বিলম্বিত প্রতিক্রিয়া পাওয়া যায়। উপরন্তু, ইমিউনোএনজাইমোমেট্রিক অ্যাসেসের আবির্ভাব পরীক্ষাগারকে যথেষ্ট সংবেদনশীলতা প্রদান করেছে যাতে হাইপারথাইরয়েডিজমের পার্থক্য করা যায় এবং ইউথাইরয়েড জনসংখ্যার উপযোগীতা বৃদ্ধি করা যায়। TSH পরিমাপ।এই পদ্ধতিটি একটি দ্বিতীয় প্রজন্মের পরীক্ষা, যা হাইপারথাইরয়েড-ইউথাইরয়েড পরিসরে বৈষম্যের উপায় প্রদান করে।(৩)

2. রিএজেন্ট উপাদান প্রদান করা হয়
• প্রলিপ্ত মাইক্রোপ্লেট, 8 x 12 স্ট্রিপ, 96 কূপ, মাউস মনোক্লোনাল অ্যান্টি-টিএসএইচ দিয়ে প্রি-কোটেড।
• ক্যালিব্রেটর, 6টি শিশি, প্রতিটি 1 মিলি, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত;ঘনত্ব: 0(A), 0.5(B), 2(C), 5(D), 10(E) এবং 25(F) μIU/mL।
• এনজাইম কনজুগেট, 1 শিশি, BSA (বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন) ধারণকারী Tris-NaCl বাফারে HRP (হর্সরাডিশ পারক্সিডেস) লেবেলযুক্ত মাউস মনোক্লোনাল অ্যান্টি-টিএসএইচ-এর 6.0 মিলি।0.1% ProClin300 প্রিজারভেটিভ রয়েছে।
• সাবস্ট্রেট, 1 শিশি, 11ml, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত, (tetramethylbenzidine) TMB।
• স্টপ সলিউশন, 1 শিশি, 1 mol/l সালফিউরিক অ্যাসিডের 6.0 মিলি।
• ওয়াশ সলিউশন কনসেনট্রেট, 1 শিশি, 25 মিলি (40X ঘনীভূত), পিবিএস-টুইন ওয়াশ দ্রবণ।
• IFU, 1 কপি।
• প্লেট ঢাকনা: 1 টুকরা।

প্রয়োজনীয় উপকরণ (কিন্তু প্রদান করা হয়নি)
• 450nm এবং 620nm তরঙ্গদৈর্ঘ্য শোষণ ক্ষমতা সহ মাইক্রোপ্লেট রিডার।
• মাইক্রোপ্লেট ওয়াশার।
• ইনকিউবেটর।
• প্লেট শেকার.
• মাইক্রোপিপেটস এবং মাল্টিচ্যানেল মাইক্রোপিপেট 1.5% এর চেয়ে ভাল নির্ভুলতার সাথে 50μl সরবরাহ করে।
• শোষক কাগজ।
• বিশুদ্ধ পানি

3. পরীক্ষা পদ্ধতি

পরিমাপের আগে রোগীদের নমুনা, ক্যালিব্রেটর এবং নিয়ন্ত্রণগুলি পরিবেষ্টিত তাপমাত্রায় (18-25 ℃) নিশ্চিত করুন৷ব্যবহার করার আগে আলতোভাবে উল্টানো মাধ্যমে সমস্ত রিএজেন্ট মিশ্রিত করুন।

• শুধুমাত্র প্রয়োজনীয় কূপের সংখ্যা ব্যবহার করুন এবং প্রতিটি ক্যালিব্রেটর এবং নমুনা পরীক্ষা করার জন্য মাইক্রোপ্লেটের কূপগুলি ফর্ম্যাট করুন।• প্রতিটি কূপে 25 μL ক্যালিব্রেটর বা নমুনা যোগ করুন।

• প্রতিটি কূপে 100 μL এনজাইম কনজুগেট যোগ করুন।

• মিশ্রিত করার জন্য মাইক্রোপ্লেটটি 30 সেকেন্ডের জন্য আলতোভাবে ঝাঁকান।

• প্লেটটিকে একটি প্লেটের ঢাকনা দিয়ে ঢেকে দিন এবং 60 মিনিটের জন্য 37℃ তাপমাত্রায় ইনকিউবেট করুন।

• ডিক্যান্টেশন বা আকাঙ্খা দ্বারা মাইক্রো প্লেটের বিষয়বস্তু বাদ দিন।ডিক্যান্টিং হলে, শোষক কাগজ দিয়ে প্লেটটি শুকিয়ে ট্যাপ করুন এবং ব্লট করুন।

• 350 μL ওয়াশ সলিউশন, ডিক্যান্ট (ট্যাপ এবং ব্লট) বা অ্যাসপিরেট যোগ করুন।মোট 5টি ধোয়ার জন্য 4 অতিরিক্ত বার পুনরাবৃত্তি করুন।একটি স্বয়ংক্রিয় মাইক্রোপ্লেট স্ট্রিপ ওয়াশার ব্যবহার করা যেতে পারে।ধোয়ার শেষে, প্লেটটি উল্টে দিন এবং শোষক কাগজের উপর যেকোন অবশিষ্ট ধোয়ার দ্রবণটি আলতো চাপুন।

• প্রতিটি কূপে 100 μL সাবস্ট্রেট যোগ করুন।

• 20 মিনিটের জন্য প্রতিক্রিয়ার জন্য অন্ধকারে পরিবেষ্টিত তাপমাত্রায় (18-25℃) ঢেকে রাখুন।সাবস্টেট যোগ করার পরে প্লেট ঝাঁকান না।

• প্রতিটি কূপে 50 μL স্টপ দ্রবণ যোগ করুন।

• কূপের মধ্যে তরল মেশানোর জন্য 15-20 সেকেন্ডের জন্য ঝাঁকান।এটি নিশ্চিত করা গুরুত্বপূর্ণ যে নীল রঙ সম্পূর্ণরূপে হলুদে পরিবর্তিত হয়।

• একটি মাইক্রো প্লেট রিডারে প্রতিটি কূপের শোষণ 450 এনএম ( রেফারেন্স তরঙ্গদৈর্ঘ্য হিসাবে 620 থেকে 630 এনএম ব্যবহার করে ভাল অসম্পূর্ণতা কমাতে) পড়ুন।স্টপ সমাধান যোগ করার 30 মিনিটের মধ্যে ফলাফল পড়া উচিত