অ্যান্টিবডি সনাক্তকরণের জন্য এইচইভি আইজিএম এলিসা টেস্ট কিট সিরাম বনাম প্লাজমা

হেপাটাইটিস ই ভাইরাস (ELISA) থেকে IgM অ্যান্টিবডির জন্য ডায়াগনসিট কিট
ক্যাটালগ নং:BE402A

1. নীতি

এই কিটটি কঠিন ফেজ নিযুক্ত করে, দুই-পদক্ষেপের ইনকিউবেশন পদ্ধতির সাথে সিরাম বা প্লাজমাতে HEV (এন্টি-এইচইভি) এর আইজিএম অ্যান্টিবডি সনাক্ত করার জন্য ELISA পদ্ধতি ক্যাপচার করে।পলিস্টাইরিন মাইক্রোওয়েল পিউরিফাইড অ্যাক্টিভেটেড মাউস অ্যান্টি হিউম্যান আইজিএম (μ চেইন) মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি দিয়ে প্রি-লেপযুক্ত।HRP কনজুগেটেড রিকম্বিন্যান্ট HEV অ্যান্টিজেন ট্রেসার হিসেবে কাজ করে।TMB হল HRP-এর সাবস্ট্রেট।সাবস্ট্রেট TMB-এর সাথে এনজাইম বিক্রিয়া একটি রঙ পরিবর্তন করে, এবং 450 এনএম-এ শোষণের তীব্রতা নমুনায় অ্যান্টি-এইচইভি অ্যান্টিবডি IgM-এর উপস্থিতি বা অনুপস্থিতি নির্দেশ করে।পরীক্ষাটি সুনির্দিষ্ট, সংবেদনশীল, প্রজননযোগ্য এবং পরিচালনা করা সহজ।এটি প্রাথমিক সংক্রমণ এবং মহামারী জরিপ নির্ণয়ের জন্য।

2. উপকরণ সরবরাহ করা হয়েছে

1. অ্যান্টিজেন প্রলিপ্ত মাইক্রো ওয়েল প্লেট 1 ব্লক (96ওয়েল)
2. নমুনা পাতলা 1 বোতল (12 মিলি)
3. এনজাইম কনজুগ্যান্ট (মানববিরোধী IgM -HRP) 1 বোতল (12ml)
4. নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ 1 শিশি (1ml)
5. ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ 1 শিশি (1ml)
6.20 এক্স ওয়াশ বাফার (ব্যবহারের আগে পাতলা করা) 1 বোতল (30 মিলি)
7. সাবস্ট্রেট A 1 বোতল (6ml)
8. সাবস্ট্রেট B 1 বোতল (6ml)
9. স্টপ সলিউশন (2M H2SO4) 1 বোতল (6ml)
10. প্লাস্টিকের ব্যাগ 1 ব্যাগ
11. সিল কাগজ 3 টুকরা
12. ম্যানুয়াল 1 প্রতিটি

3 পরীক্ষা পদ্ধতি

1. হেপাটাইটিস ই ভাইরাস (সমস্ত রিএজেন্ট) থেকে অ্যান্টিবডি IgG-এর জন্য ELISA কিট এবং নমুনাগুলি ব্যবহারের আগে (প্রায় 30 মিনিট) ঘরের তাপমাত্রায় আনুন।

2. ddH2O দিয়ে ঘনীভূত ওয়াশ বাফার 1:19 পাতলা করুন।

3. প্রতিটি পরীক্ষার জন্য, একটি ফাঁকা, দুটি ইতিবাচক এবং তিনটি নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ সেট করুন।100μl পজিটিভ এবং নেগেটিভ কন্ট্রোল সিরাম যথাক্রমে ইতিবাচক এবং নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ কূপে যোগ করুন।

4. একে অপরের ভাল পরীক্ষায় 100μl নমুনা তরল যোগ করুন, তারপরে 10 μl পরীক্ষার নমুনা পরীক্ষা কূপে যোগ করুন।নমুনাগুলি ভালভাবে মিশ্রিত করতে পাইপেট উপরে এবং নীচে।

5. সিল কাগজ দিয়ে কূপগুলিকে ঢেকে দিন, এবং তারপর 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 30 মিনিট সেঁকুন।

6. সমস্ত কূপের তরল ফেলে দিন এবং ধোয়ার দ্রবণ দিয়ে কূপগুলি পূরণ করুন।15 সেকেন্ডের জন্য একপাশে রাখুন, সমস্ত কূপের তরল ফেলে দিন এবং ধোয়ার দ্রবণ দিয়ে কূপগুলি পূরণ করুন।5 বার পুনরাবৃত্তি করুন এবং শেষ ধোয়ার পরে কূপগুলি শুকিয়ে নিন।

7. ফাঁকা ছাড়া প্রতিটি কূপে 100 μl এনজাইম কনজুগ্যান্ট যোগ করুন।

8. সীল কাগজ দিয়ে কূপগুলিকে ঢেকে দিন, এবং তারপর 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 30 মিনিট সেঁকুন।

9. ধাপ 6 পুনরাবৃত্তি করুন।

10. ফাঁকা কূপ সহ প্রতিটি কূপে যথাক্রমে 50μl সাবস্ট্রেট A এবং B যোগ করুন।আলতোভাবে মিশ্রিত করুন, আলো থেকে সুরক্ষিত করুন এবং 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 15 মিনিটের মধ্যে ইনকিউবেট করুন।

11. প্রতিক্রিয়া বন্ধ করতে প্রতিটি কূপে 50μl স্টপ দ্রবণ যোগ করুন, ফাঁকা কূপ সহ।

12. শূন্যের বিপরীতে 450 nm-এ শোষণ পরিমাপ করুন বা 450 nm/630-690 nm-এ শোষণ পরিমাপ করুন।