উদ্দেশ্যঃ
এই কিটটি মানব সেরামে TLR4 ঘনত্ব নির্ধারণের অনুমতি দেয়।
পরীক্ষার নীতি
নমুনায় মানব TLR4 এর মাত্রা নির্ধারণ করে, প্যারিফাইড হিউম্যান TLR4 অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে মাইক্রোটিটার প্লেটের কূপগুলি আবরণ করুন, সলিড-ফেজ অ্যান্টিবডি তৈরি করুন, তারপর কূপগুলিতে TLR4 যোগ করুন,সংযুক্ত TLR4 অ্যান্টিবডি যা HRP লেবেলযুক্ত, অ্যান্টিবডি-অ্যান্টিজেন-এনজাইম-অ্যান্টিবডি কমপ্লেক্স হয়ে যায়, ধোয়ার পর সম্পূর্ণরূপে, টিএমবি সাবস্ট্র্যাট সলিউশন যোগ করুন, টিএমবি সাবস্ট্র্যাট নীল রঙের হয়ে যায় এইচআরপি এনজাইম-ক্যাটালিজড,প্রতিক্রিয়াটি সালফুরিক অ্যাসিডের দ্রবণ যোগ করে শেষ হয় এবং রঙের পরিবর্তনটি 450 এনএম তরঙ্গদৈর্ঘ্যে বর্ণনাকারীভাবে পরিমাপ করা হয়তারপর নমুনায় মানব TLR4 এর ঘনত্ব নির্ধারণ করা হয় নমুনার ওডি স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখার সাথে তুলনা করে।
টেকনিক্যাল প্যারামিটারঃ
| পণ্যের নামঃ |
মানব TLR4 RUO ELISA টেস্টিং কিট |
| উৎপত্তি দেশ: |
চীন |
| নমুনা প্রকারঃ |
সিরাম, প্লাজমা |
| নমুনাঃ |
সিরাম ৫০ μl |
| সংরক্ষণের তাপমাত্রাঃ |
২-৮°সি |
| শেল্ফ লাইফঃ |
৬ মাস |
| সংবেদনশীলতা: |
উচ্চ |
| পরীক্ষার সময়ঃ |
১ ঘন্টা |
| কিটের আকার: |
৯৬ পরীক্ষা |
| অ্যাপ্লিকেশনঃ |
চিকিৎসা সংক্রান্ত রোগ নির্ণয় |
কিটের সাথে সরবরাহিত উপকরণঃ
| 1 |
ওয়াশিং সলিউশন |
২০ মিলি × ১ বোতল |
7 |
সমাধান বন্ধ করুন |
6 মিলি × 1 বোতল |
| 2 |
এইচআরপি-কনজিগেট রিএজেন্ট |
6 মিলি × 1 বোতল |
8 |
স্ট্যান্ডার্ড ((৩২ এনজি/এমএল) |
0.5 মিলি × 1 বোতল |
| 3 |
মাইক্রোলিসা স্ট্রিপলেট |
12well × 8 স্ট্রিপ |
9 |
স্ট্যান্ডার্ড ডিলেন্ট |
1.৫ মিলি × ১ বোতল |
| 4 |
নমুনা দ্রবণীয় |
6 মিলি × 1 বোতল |
10 |
নির্দেশাবলী |
1 |
| 5 |
ক্রোমোজেন সলিউশন এ |
6 মিলি × 1 বোতল |
11 |
বন্ধনী প্লেটের ঝিল্লি |
2 |
| 6 |
ক্রোমোজেন সলিউশন বি |
6 মিলি × 1 বোতল |
12 |
সিল করা ব্যাগ |
1 |
|
নমুনার প্রয়োজনীয়তা
- নমুনা সংগ্রহের পর যত তাড়াতাড়ি সম্ভব বের করা উচিত এবং প্রাসঙ্গিক সাহিত্যের মতে, বের করার পর যত তাড়াতাড়ি সম্ভব পরীক্ষা করা উচিত। যদি এটি সম্ভব না হয়,নমুনা সংরক্ষণের জন্য -২০ ডিগ্রি সেলসিয়াসে রাখা যেতে পারে, পুনরাবৃত্তিকৃত হিমায়ন-নমন চক্র এড়িয়ে চলুন।
- NaN3 ধারণকারী নমুনা সনাক্ত করা যায় না, কারণ NaN3 HRP সক্রিয় বাধা দেয়।
মূল্যায়ন পদ্ধতি
- দ্রবীভূত করুন এবং নমুনা যোগ করুনঃদ্রবীভূত করুন মূল ঘনত্ব নিম্নলিখিত টেবিলের মতো মানঃ
| ১৬ এন জি/এম এল |
5 স্ট্যান্ডার্ড |
150μl মূল ঘনত্ব স্ট্যান্ডার্ড+150μl স্ট্যান্ডার্ড ডিলেন্ট |
| ৮ এন জি/এম এল |
4 স্ট্যান্ডার্ড |
150μl 5 স্ট্যান্ডার্ড + 150μl স্ট্যান্ডার্ড ডিলেন্ট |
| ৪ এন জি/এম এল |
3 স্ট্যান্ডার্ড |
150μl 4 স্ট্যান্ডার্ড + 150μl স্ট্যান্ডার্ড ডিলেন্ট |
| ২ এন জি/এম এল |
2 স্ট্যান্ডার্ড |
150μl 3 স্ট্যান্ডার্ড + 150μl স্ট্যান্ডার্ড ডিলেন্ট |
| ১ এন জি/এম এল |
1 স্ট্যান্ডার্ড |
150μl 2 স্ট্যান্ডার্ড + 150μl স্ট্যান্ডার্ড ডিলেন্ট |
|
2. নমুনা যোগ করুনঃ ফাঁকা কূপগুলি আলাদাভাবে সেট করুন (ফাঁকা তুলনা কূপগুলিতে নমুনা এবং এইচআরপি-কনজিগেট রিএজেন্ট যোগ করবেন না, অন্যথায় প্রতিটি পদক্ষেপের অপারেশন একই) । পরীক্ষার নমুনা কূপ।মাইক্রোলিসা স্ট্রিপলেটটিতে 50μl স্ট্যান্ডার্ড যোগ করুন, পরীক্ষার নমুনা কূপের মধ্যে 40μl নমুনা দ্রবীভূত করুন, তারপরে 10μl পরীক্ষার নমুনা যুক্ত করুন (নমুনা চূড়ান্ত দ্রবীভূত 5 গুণ), কূপগুলিতে নমুনা যুক্ত করুন, যতটা সম্ভব কূপের প্রাচীর স্পর্শ করবেন না এবং সাবধানে মিশ্রিত করুন।
3. ইনকিউবেট করুনঃ ক্লোজার প্লেট ঝিল্লি দিয়ে প্লেট বন্ধ করার পরে, 37°C এ 30 মিনিট ইনকিউবেট করুন।
4. তরল কনফিগার করুনঃ ৩০ (অথবা ২০) বার ওয়াশ সলিউশন ডিস্টিলড ওয়াটার এবং রিজার্ভের সাথে ৩০ (অথবা ২০) বার দ্রবীভূত।
5. ধোয়াঃ বন্ধ প্লেট ঝিল্লি উন্মোচন করুন, তরলটি ফেলে দিন, সুইং দ্বারা শুকিয়ে নিন, প্রতিটি কূপে ওয়াশিং বাফার যুক্ত করুন, 30 সেকেন্ডের জন্য স্থির করুন তারপরে ড্রেন করুন, 5 বার পুনরাবৃত্তি করুন, প্যাট দ্বারা শুকিয়ে নিন।
6এনজাইম যোগ করুনঃ HRP-Conjugate রিএজেন্ট 50μl প্রতিটি কূপ, ফাঁকা কূপ ছাড়া যোগ করুন।
7ইনকিউবেটঃ অপারেশন ৩।
8ওয়াশিংঃ ৫ দিয়ে অপারেশন।
9. রঙঃ প্রতিটি কূপের মধ্যে ক্রোমোজেন সলিউশন A 50ul এবং ক্রোমোজেন সলিউশন B 50ul যোগ করুন, 37°C এ 10 মিনিটের জন্য আলোর সংরক্ষণ এড়ান
10.প্রতিক্রিয়া বন্ধ করুন:প্রতিটি পুঁজকে স্টপ সলিউশন ৫০μl যোগ করুন, প্রতিক্রিয়া বন্ধ করুন ((নীল রঙ হলুদ রঙের পরিবর্তন) ।
11.পরীক্ষাঃ শূন্য হিসাবে খালি ভাল নিন, 450nm এ শোষণযোগ্যতা পড়ুন এবং 15 মিনিটের মধ্যে সমাধান বন্ধ করার পরে।
গণনা করুন
মান ঘনত্বকে অনুভূমিক হিসাবে নিন, উল্লম্বের জন্য OD মান, গ্রাফ কাগজে মান বক্ররেখা আঁকুন,নমুনা কার্ভ দ্বারা নমুনা OD মান অনুযায়ী সংশ্লিষ্ট ঘনত্ব খুঁজুন, ডিলেশন মাল্টিপল দ্বারা গুণিত, অথবা স্ট্যান্ডার্ড ঘনত্ব এবং ওডি মানের সাথে স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখার সোজা রেখা রিগ্রেশন সমীকরণ গণনা করুন, সমীকরণে নমুনা ওডি মান সহ,নমুনার ঘনত্ব গণনা করুন, ডিলেশন ফ্যাক্টর দ্বারা গুণিত, ফলাফলটি নমুনার প্রকৃত ঘনত্ব।
আপনার বার্তাটি 20-3,000 টির মধ্যে হতে হবে!
