মানব TNF-α Elisa টেস্ট কিট

উদ্দেশ্যযুক্ত ব্যবহার

এই কিটটি হিউম্যান সেল কালচার সুপারনেটে TNF-α ঘনত্ব নির্ধারণের জন্য ব্যবহৃত হয়।

মূল্যায়ন পদ্ধতি

1. দ্রবীভূত করুন এবং নমুনা যোগ করুন:দ্রবীভূত করুন মূল ঘনত্ব নিম্ন টেবিলের জন্য স্ট্যান্ডার্ডঃ 400ng/L 5 Standard 150μl Original density Standard+150μl Standard diluent 200ng/L 4 Standard 150μl 5 Standard+150μl Standard diluent 100ng/L 3 Standard 150μl 4 Standard+150μl Standard diluent 50ng/L 2 Standard 150μl 3 Standard +150μl Standard diluent 25ng/L 1 Standard 150μl 2 Standard +150μl Standard diluent

2. নমুনা যোগ করুনঃ ফাঁকা কূপগুলি আলাদাভাবে সেট করুন (ফাঁকা তুলনা কূপগুলি নমুনা এবং এইচআরপি-কনজুগ্যাট রিএজেন্ট যুক্ত করে না, অন্যথায় প্রতিটি পদক্ষেপের অপারেশন একই) । পরীক্ষার নমুনা আমরা lমাইক্রোলিসা স্ট্রিপলেটটিতে 50μl স্ট্যান্ডার্ড যোগ করুনপরীক্ষার নমুনাতে 40μl নমুনা দ্রবীভূত করুন, তারপর পরীক্ষার নমুনা 10μl যোগ করুন (নমুনা চূড়ান্ত দ্রবীভূতকরণ 5 গুণ), নমুনাটি যোগ করুন, যতটা সম্ভব প্রাচীরটি স্পর্শ করবেন না, এবং সাবধানে মিশ্রিত করুন।

3. ইনকিউবেট করুনঃ ক্লোজার প্লেট ঝিল্লি দিয়ে প্লেট বন্ধ করার পরে, 37°C এ 30 মিনিট ইনকিউবেট করুন।

4. তরল কনফিগার করুনঃ ৩০ (অথবা ২০) বার ওয়াশিং সলিউশন ডিস্টিলিড ওয়াটার এবং রিজার্ভ দিয়ে ৩০ (অথবা ২০) বার দ্রবীভূত।

5. ধোয়াঃ বন্ধ প্লেট ঝিল্লি উন্মোচন, নিক্ষেপ তরল, সুইং দ্বারা শুকনো, প্রতিটি ওয়েল ধোয়া বাফার যোগ করুন, 30s জন্য স্টিল তারপর ড্রেন, 5 বার পুনরাবৃত্তি, pat দ্বারা শুকনো।

6. এনজাইম যোগ করুনঃ ব্ল্যাক ওয়েল ব্যতীত প্রতিটি ওয়েলে 50μl HRP-Conjugate Reagent যোগ করুন।

7. ইনকিউবেট: অপারেশন ৩।

8. ধোয়ার পদ্ধতিঃ ৫ দিয়ে অপারেশন।

9.color:প্রতিটি ওয়েলে ক্রোমোজেন সলিউশন A 50ul এবং ক্রোমোজেন সলিউশন B 50ul যোগ করুন, 37°C এ 10 মিনিটের জন্য আলোর সংরক্ষণ এড়িয়ে চলুন

10.প্রতিক্রিয়া বন্ধ করুন:প্রতিটি ওয়েলে স্টপ সলিউশন 50μl যোগ করুন, প্রতিক্রিয়া বন্ধ করুন ((নীল রঙ হলুদ রঙের পরিবর্তন) ।

11. টেস্টঃ শূন্য হিসাবে খালি গ্রহণ করুন, 450nm এ শোষণযোগ্যতা পড়ুন এবং 15 মিনিটের মধ্যে সমাধান বন্ধ করুন।

নমুনার প্রয়োজনীয়তা

1. নমুনা সংগ্রহের পর যত তাড়াতাড়ি সম্ভব এবং প্রাসঙ্গিক সাহিত্যের মতে বের করা উচিত এবং বের করার পর যত তাড়াতাড়ি সম্ভব পরীক্ষা করা উচিত।1 নমুনা সংরক্ষণের জন্য 20 °C এ রাখা যেতে পারে, পুনরাবৃত্তিকৃত হিমায়ন-নমন চক্র এড়িয়ে চলুন।

2. NaN3 ধারণকারী নমুনা সনাক্ত করা যায় না, কারণ NaN3 HRP সক্রিয় বাধা দেয়।

গুরুত্বপূর্ণ নোট

1. কিটটি রেফ্রিজারেশন পরিবেশ থেকে বের করে নেওয়া উচিত 15-30 মিনিট রুম তাপমাত্রায় ভারসাম্যপূর্ণ, ELISA প্লেট আবৃত যদি খোলা পরে ব্যবহার করা হয় না,প্লেটটি সিলড ব্যাগে সংরক্ষণ করা উচিত.

2. ওয়াশিং বাফার উইল ক্রিস্টালাইজেশন বিচ্ছেদ, এটি গরম করা যেতে পারে জল দ্রবীভূত যখন দ্রবীভূত করতে সাহায্য করে। ওয়াশিং ফলাফল প্রভাবিত করে না।

3. প্রতিটি ধাপে নমুনা মেশিন দিয়ে নমুনা যোগ করুন, এবং প্রায়শই এর নির্ভুলতা সংশোধন করুন, পরীক্ষামূলক ত্রুটি এড়ান। 5 মিনিটের মধ্যে নমুনা যোগ করুন, যদি নমুনার সংখ্যা অনেক হয়, ভোলির ব্যবহার করার পরামর্শ দিন।

4. যদি পরীক্ষার উপাদানটির পরিমাণ অত্যধিক বেশি হয় (নমুনা ওডি প্রথম স্ট্যান্ডার্ড ওয়েল ের চেয়ে বড়), অনুগ্রহ করে নমুনাটি হ্রাস করুন (এন-ফোল্ড), অনুগ্রহ করে হ্রাস করুন এবং হ্রাসের গুণক দ্বারা গুণ করুন।(×n×5).

5. ক্রস-দূষণ এড়াতে বন্ধক প্লেট ঝিল্লি শুধুমাত্র disposable ব্যবহার সীমাবদ্ধ।

6. সাবস্ট্রেটটি আলোর সংরক্ষণ থেকে সরে যায়।

7অনুগ্রহ করে ব্যবহারের নির্দেশাবলী কঠোরভাবে অনুসরণ করুন, পরীক্ষার ফলাফল নির্ধারণের জন্য মাইক্রোটাইটার প্লেট রিডারকে স্ট্যান্ডার্ড হিসাবে নিতে হবে।

8. সমস্ত নমুনা, ওয়াশিং বাফার এবং প্রতিটি ধরণের বর্জ্য সংক্রামক উপাদান প্রক্রিয়া অনুযায়ী করা উচিত।

9অন্যান্য লটের রিএজেন্টের সাথে মিশ্রিত করবেন না।