RUO HBsAg Elisa কিট

HBsAg সনাক্তকরণের জন্য এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসর্বেন্ট টেস্টসিরাম বা প্লাজমাতে

HBsAg EIA হল একটি সলিড-ফেজ একযোগে স্যান্ডউইচ ইমিউনোসেই, যা HBsAg এর জন্য নির্দিষ্ট একক ক্লোনাল অ্যান্টিবডি এবং পলিক্লোনাল অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে।মাইক্রোটিটার ভালভাবে HBsAg এর জন্য নির্দিষ্ট একক ক্লোনাল অ্যান্টিবডি দিয়ে আবৃত. একটি সিরাম নমুনা এন্টিবডি লেপযুক্ত মাইক্রোটিটার কূপগুলিতে এনজাইম সংযুক্ত পলিক্লোনাল অ্যান্টিবডিগুলির সাথে যুক্ত করা হয়। এইচবিএসএজি, যদি উপস্থিত থাকে তবে একটি অ্যান্টিবডি-এইচবিএসএজি-অ্যান্টিবডি-এনজাইম কমপ্লেক্স গঠন করবে।তারপর প্লেটটি ধুয়ে ফেলা হয়অবশেষে, সুত্রের একটি সমাধান যোগ করা হয় এবং ইনকিউবেট করা হয়। নমুনায় উপস্থিত HBsAg এর পরিমাণের অনুপাতে একটি নীল রঙ বিকাশ করবে। The enzyme-substrate reaction can be stopped and the result is visualized by naked eye or read by EIA plate reader for absorbance at the wavelength of 450 nm(450 nm/630 nm) and is proportional to the amount of antibodies present in the specimen..

কিটগুলির সাথে সরবরাহিত উপকরণঃ

পরীক্ষার পদ্ধতিঃ

এটি দৃঢ়ভাবে প্রতিটি নমুনা এবং নিয়ন্ত্রণের বিশ্লেষণ করার পরামর্শ দেওয়া হয়। ব্যবহারের আগে সমস্ত reagents রুম তাপমাত্রা সমতুল্য করা উচিত।

1. পজিটিভ কন্ট্রোল এবং নেগেটিভ কন্ট্রোলের এক ফোঁটা (50μl) দুইবার সংশ্লিষ্ট কূপগুলিতে বিতরণ করুন। ব্যাকগ্রাউন্ড কন্ট্রোল হিসাবে একটি ফাঁকা কূপ সেট করুন,এবং 50ul সিরাম বা প্লাজমা নমুনা সংশ্লিষ্ট পরীক্ষা কূপ মধ্যে.
2. প্রতিটি কূপের মধ্যে এক ফোঁটা (50μl) এনজাইম কনজুগেট যোগ করুন। 1 মিনিটের জন্য সমতল বেঞ্চে মাইক্রোটাইটার প্লেটটি ঘুরিয়ে এটি নরমভাবে মিশ্রিত করুন।খালি কুয়োতে এনজাইম কনজুগ্যাট যোগ করবেন না।
3. মাইক্রোটিটার প্লেটগুলোকে একটি আর্দ্র বাক্সে রাখুন এবং ৩০ মিনিট ধরে ৩৭ ডিগ্রি সেলসিয়াসে ইনকিউবেট করুন।
4. প্রতিটি কূপকে 5 বার ধুয়ে নিন, প্রতিটি কূপকে দ্রবীভূত ওয়াশিং বাফার দিয়ে ভরাট করুন, তারপরে সমস্ত জল বের করার জন্য প্লেটটি জোরালোভাবে উল্টে দিন এবং শোষণকারী কাগজে কূপগুলির প্রান্তটি কয়েক সেকেন্ডের জন্য ব্লক করুন।
5. প্রতিটি কূপে একটি ড্রপ (50μl) সাবস্ট্র্যাট সলিউশন A (HRP-substrate) যোগ করুন, তারপরে প্রতিটি কূপে একটি ড্রপ (50μl) সাবস্ট্র্যাট সলিউশন B (TMB) যোগ করুন। সাবধানে মিশ্রিত করুন এবং 15 মিনিটের জন্য 37 °C এ ইনকিউবেট করুন।
6. রঙের প্রতিক্রিয়া বন্ধ করার জন্য প্রতিটি কূপে স্টপ সলিউশনের 1 ড্রপ (50μl) যোগ করুন। ডুয়াল ফিল্টার প্লেট রিডার দিয়ে 450 nm/630 nm এ OD মানটি পড়ুন।এটি একটি একক ফিল্টার প্লেট রিডার দিয়ে 450 এনএম এ ওডি মান পড়তে বিকল্প. (সমস্ত কূপ থেকে সমস্ত OD রিডিং সংশোধন করার জন্য ফাঁকা কূপের OD মান ব্যবহার করে)