RUO HBcAb Elisa কিট

RUO HBcAb ELISA পরীক্ষার উদ্দেশ্য মানব সিরাম/প্লাস্মাতে হেপাটাইটিস বি ভাইরাসের কোর অ্যান্টিজেনের বিরুদ্ধে অ্যান্টিবডিগুলির গুণগত সনাক্তকরণের জন্য।

হেপডনাভিরাইডি পরিবারের অংশ হিসাবে, এইচবিভি একটি আবৃত, ডাবল-স্ট্র্যান্ডড ডিএনএ ভাইরাস যা রক্তের মাধ্যমে হেপাটাইটিসের সংক্রমণের প্রাথমিক কারণ।এইচবিভি সংক্রমণের প্রভাব হালকা থেকে গুরুতর হেপাটাইটিস পর্যন্ত, যার মধ্যে রয়েছে দীর্ঘস্থায়ী লিভার সমস্যা যেমন কার্সিনোমা এবং সিরোসিস।সংক্রমণের তিনটি পর্যায়ে সেরোলজিক্যাল মার্কার সনাক্ত করা প্রয়োজন - ইনকিউবেশনএই ভাইরাসের প্রধান উপাদান হ'ল হেপাটাইটিস বি কোর অ্যান্টিজেন (এইচবিসিএজি) ।এই কোর অ্যান্টিজেনটি প্রায় 17kD এর একটি একক পলিপেপটাইডের সমন্বয়ে গঠিত যা কোর কণাগুলির বিচ্ছিন্নতার পরে মুক্তি পায়. অ্যান্টিজেনটিতে কমপক্ষে একটি ইমিউনোলজিকাল ডিটারমিন্যান্ট উপস্থিত থাকে। HBsAg এর সূত্রপাতের কিছুক্ষণ পরে, HBcAg এর অ্যান্টিবডি (অ্যান্টি-এইচবিসি মোট অ্যান্টিবডি এবং আইজিএম) উপস্থিত হয় এবং কখনও চলে যায় না। বিচ্ছিন্ন ক্ষেত্রে,একটি হেপাটাইটিস বি সংক্রমণ ইমিউনোলজিক্যালভাবে সনাক্তযোগ্য এন্টি-এইচবিসি ছাড়াই সংক্রামিত হতে পারে। এটি সাধারণত ইমিউনোসপ্রেসড রোগীদের মধ্যে পাওয়া যায়।বিভিন্ন জনগোষ্ঠীর মধ্যে হেপাটাইটিস বি এর প্রাদুর্ভাব সম্পর্কে অ্যান্টি-এইচবিসি স্ক্রিনিংয়ের তথ্য পাওয়া যায়এটি কারণ এন্টি-এইচবিসি হ'ল তীব্র, দীর্ঘস্থায়ী বা সমাধান হওয়া এইচবিভি সংক্রমণের একটি চিহ্নিতকারী। ক্লিনিকাল সেটিংসে নির্ণয়ের সময় এন্টি-এইচবিসি সনাক্তকরণ অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ।অন্যান্য হেপাটাইটিস বি পরীক্ষার সাথে, এন্টি-এইচবিসি মার্কার সঠিক নির্ণয় এবং ভাইরাসটির অগ্রগতির সঠিক পর্যবেক্ষণের অনুমতি দেয়।এন্টি-এইচবিসি সম্ভাব্যভাবে হেপাটাইটিস বি সংক্রমণের একমাত্র সূচক হতে পারে (এইচবিএসএজি-নেগেটিভ রোগীদের অন্যান্য পরীক্ষা সহ).

উপকরণ ও উপাদান

মাইক্রোপ্লেটঃসাদা স্ট্রিপ হোল্ডারে স্থির খালি মাইক্রোওয়েল স্ট্রিপ। প্লেটটি অ্যালুমিনিয়াম পকেটে ডেসিকেন্ট দিয়ে সিল করা হয়। প্রতিটি কূপে বিশুদ্ধ এইচবিসিএজি থাকে। মাইক্রোওয়েল স্ট্রিপগুলি আলাদাভাবে ব্যবহারের জন্য ভাঙা যেতে পারে।অব্যবহৃত কুয়ো বা স্ট্রিপগুলিকে সরবরাহিত প্লাস্টিকের সিলযোগ্য সঞ্চয় প্যাকেজে ডেসিকেন্টের সাথে রাখুন এবং 2-8 ডিগ্রি সেলসিয়াসে ফিরিয়ে আনুনএকবার খোলা হলে, ২-৮°C এ এক মাস ধরে স্থিতিশীল থাকে।

নেগেটিভ কন্ট্রোলঃ(1x1. 0 মিলি প্রতি ফ্লেক) সংরক্ষণ করুন।0.1% ProClinTM 300 সবুজ স্ক্রু ক্যাপ সহ একটি ভ্যানায় ভরা হলুদ রঙের তরল। প্রোটিন-স্থিতিশীল বাফারটি HBcAb এর জন্য অ-প্রতিক্রিয়াশীল পরীক্ষা করা হয়েছে। সরবরাহ হিসাবে ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত। একবার খোলা, 2-8 ডিগ্রি সেলসিয়াসে এক মাস ধরে স্থিতিশীল।

পজিটিভ কন্ট্রোলঃ(1x1. 0 মিলি প্রতি ফ্লেক) সংরক্ষণ করুন।0.1% ProClinTM 300 লাল রঙের তরল একটি লাল স্ক্রু ক্যাপ সহ একটি ফ্লেক্সে ভরা। HBcAb প্রোটিন- স্থিতিশীল বাফারে দ্রবীভূত। সরবরাহ হিসাবে ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত। একবার খোলা, 2-8 ডিগ্রি সেলসিয়াসে এক মাসের জন্য স্থিতিশীল।

কনজগ্যাট:(1x6ml প্রতি vial) সংরক্ষণ করুন।00. 1% ProClinTM 300 লাল রঙের তরল একটি সাদা ফ্লেক্সে লাল স্ক্রু ক্যাপ সহ। হর্স পেরোক্সিডেস-সংযুক্ত HBcAg- এর জন্য একক ক্লোনাল অ্যান্টিবডি। সরবরাহ হিসাবে ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত। একবার খোলা হলে,২-৮°সি তে এক মাসের জন্য স্থিতিশীল.

ওয়াশ বাফার:(1x20ml প্রতি বোতল) ব্যবহারের আগে দ্রবীভূত করুন! ডিটারজেন্ট Tween-20 বর্ণহীন তরল সাদা স্ক্রু ক্যাপ সহ একটি সাদা বোতলে ভরাট PH 7.4, 20 × পিবিএস কনসেন্ট্রেটটি দ্রবীভূত করতে হবে১ থেকে ১৯ব্যবহারের আগে দ্রবীভূত/ডিওনিফাইড পানি দিয়ে। একবার দ্রবীভূত, ঘরের তাপমাত্রায় এক সপ্তাহের জন্য স্থিতিশীল, অথবা 2-8 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করা হলে দুই সপ্তাহের জন্য।

সাবস্ট্র্যাট A:(1x6ml প্রতি vial) সবুজ স্ক্রু ক্যাপ সহ একটি সাদা vial মধ্যে ভরা রঙিন তরল। ইউরিয়া পারক্সাইড সমাধান। সরবরাহ হিসাবে ব্যবহার করার জন্য প্রস্তুত। একবার খোলা, 2-8 °C এ এক মাস স্থায়ী।

সাবস্ট্র্যাট বি:(1x6ml প্রতি vial) কালো স্ক্রু ক্যাপ সহ একটি কালো vial মধ্যে ভরা রঙিন তরল.TMB (Tetramethyl benzidine) সমাধান. সরবরাহ হিসাবে ব্যবহার করার জন্য প্রস্তুত. একবার খোলা, 2-8 °C এ এক মাস ধরে স্থিতিশীল।

সমাধান বন্ধ করুন:(1x6ml প্রতি vial) সাদা স্ক্রু ক্যাপ সহ একটি সাদা vial মধ্যে বর্ণহীন তরল.₂তাই₄) সরবরাহিত হিসাবে ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত। একবার খোলা, 2-8°C এ এক মাসের জন্য স্থিতিশীল।

প্লাস্টিকের সিলযোগ্য ব্যাগঃব্যবহার না করা স্ট্রিপগুলি সংযুক্ত করার জন্য 1 ইউনিট

প্যাকেজ INSERT১ কপি

কার্ডবোর্ড প্লেট কভার২টি পত্র

ইনকিউবেশন চলাকালীন প্লেটগুলি আবরণ করা এবং কূপগুলির বাষ্পীভবন বা দূষণ রোধ করা।

পদ্ধতি

রেজেন্টস প্রস্তুতিঃরিএজেন্টগুলিকে ঘরের তাপমাত্রা (18-30°C) এ পৌঁছানোর অনুমতি দিন। ওয়াশিং বুফারটি (20X) ওয়াশিংয়ের নির্দেশাবলীতে নির্দেশিত হিসাবে দ্রবীভূত করুন।বাফারটি পাতলা করার জন্য নিষ্কাশিত বা ডি-আইওনিজড জল এবং শুধুমাত্র পরিষ্কার পাত্রে ব্যবহার করুনঅন্যান্য সমস্ত রিএজেন্টসরবরাহিত হিসাবে ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত.

1. প্রস্তুতিঃপরীক্ষা করার জন্য নিয়ন্ত্রণ এবং রোগীর নমুনার জন্য মাইক্রোপ্লেটগুলির গর্তগুলি ফর্ম্যাট করুন। কোনও অব্যবহৃত মাইক্রোওয়েল স্ট্রিপগুলি অ্যালুমিনিয়াম ব্যাগ সিলিংয়ে ফিরিয়ে আনুন এবং 2-8 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করুন।
2. নমুনা যোগ করা হচ্ছেঃনিয়ন্ত্রক বা নমুনাগুলির 50μl নির্ধারিত কূপের মধ্যে যোগ করুন।
3. সংযুক্ত যোগ করা হচ্ছেঃ50μl যোগ করুনকনজগ্যাটব্লাঙ্ক ছাড়া অন্য সব কূয়োতে।
4. ইনকিউবেটরঃপ্লেট ঢাকনা দিয়ে প্লেট ঢেকে রাখুন এবং 3 জন্য incubate0 মিনিট৩৭ ডিগ্রি সেলসিয়াসে।
5. ধোয়াঃইনকিউবেশনের শেষে, প্লেট কভারটি সরিয়ে ফেলুন এবং ফেলে দিন। প্রতিটি ভাল 5 বার দ্রবীভূত ওয়াশ বাফার দিয়ে ধুয়ে ফেলুন। প্রতিটি সময় মাইক্রোওয়েলগুলিকে 30-60 সেকেন্ডের জন্য ভিজতে দিন।শেষ ধোয়ার চক্রের পর, প্লেটটি ব্লাটিং পেপার বা পরিষ্কার তোয়ালেতে ঘুরিয়ে দিন এবং কোনও অবশিষ্টাংশ অপসারণের জন্য এটিতে ট্যাপ করুন।
6. Substrate যোগ করা হচ্ছে:প্রতিটি কূপে 50μl সাবস্ট্র্যাট সলিউশন A এবং 50μl সাবস্ট্র্যাট সলিউশন B যোগ করুন।১০ মিনিট৩৭ ডিগ্রি সেলসিয়াসে আলো এড়ানো।
7. স্টপ সলিউশন যোগ করা হচ্ছেঃএকটি মাল্টি-চ্যানেল পাইপেট ব্যবহার করে বা ম্যানুয়ালি, যোগ করুন50μআমিস্টপ সলিউশনের প্রতিটি পাত্রের মধ্যে রাখুন এবং সাবধানে মিশ্রিত করুন।
8. শোষণের পরিমাপঃখালি ভাল সঙ্গে প্লেট রিডার ক্যালিব্রেট এবং এ শোষণ পড়া৪৫০nmযদি একটি দ্বৈত ফিল্টার যন্ত্র ব্যবহার করা হয়, রেফারেন্স তরঙ্গদৈর্ঘ্য সেট করুন৬৩০ এনএমকট-অফ মান গণনা করুন এবং ফলাফলগুলি মূল্যায়ন করুন। (নোটঃঅভ্যন্তরীণ শোষণ গণনা১০ মিনিটপ্রতিক্রিয়া বন্ধ করার পর) ।