ইন্টারলিউকিন-২ রিসেপ্টর সাবুনিট আলফা মাউস IL2R CD25 IL2-RA ELISA কিট

মাউস ইন্টারলিউকিন-2 রিসেপ্টর সাবুনিট আলফা;IL2R;CD25; IL2-RA ELISA কিট

কিটের সাথে সরবরাহ করা সামগ্রী

নমুনা প্রয়োজনীয়তা

• সিরাম-কক্ষ তাপমাত্রায় জমাট বাঁধা 10-20 মিনিট, 2000-3000 rpm গতিতে কেন্দ্রীভূতকরণ 20-মিনিট সুপারনাট্যান্ট অপসারণ, যদি বৃষ্টিপাত দেখা দেয়, আবার কেন্দ্রীভূত হয়।
• প্লাজমা-উপযোগী EDTA বা সিট্রেট প্লাজমা অ্যান্টিকোয়াগুল্যান্ট হিসাবে ব্যবহার করুন, 10-20 মিনিট মিশ্রিত করুন, 2000-3000 rpm গতিতে সেন্ট্রিফিউগেশন 20-মিনিট সুপারনাট্যান্ট অপসারণ করুন, যদি বৃষ্টিপাত দেখা দেয়, আবার সেন্ট্রিফিউগাল।
• প্রস্রাব-একটি জীবাণুমুক্ত পাত্রে মামলা করুন, 2000-3000 rpm গতিতে সেন্ট্রিফিউগেশন 20-মিনিট সুপারনাট্যান্ট অপসারণ করুন, যদি বৃষ্টিপাত দেখা দেয়, আবার সেন্ট্রিফিউগাল।হাইড্রোথোরাক্সের অপারেশন এবং সেরিব্রোস্পাইনাল ফ্লুইড এর রেফারেন্স।
• কোষ সংস্কৃতি সুপারনাট্যান্ট-সিক্রেটরি উপাদানগুলি সনাক্ত করুন, একটি জীবাণুমুক্ত পাত্রে মামলা করুন, 2000-3000 rpm গতিতে 20-মিনিট সেন্ট্রিফিউগেশন করুন সুপারন্যাট্যান্ট অপসারণ করুন, কোষের গঠন সনাক্ত করুন, PBS(PH7.2-7.4) সহ ডিলট সেল সাসপেনশন, কোষের ঘনত্ব 1 মিলিয়নে পৌঁছেছে / মিলি, বারবার ফ্রিজ-থাও চক্র, ক্ষতি কোষ এবং অন্তঃকোষীয় উপাদানের মুক্তি, 2000-3000 rpm গতিতে সেন্ট্রিফিউগেশন 20-মিনিট সুপারনাট্যান্ট অপসারণ, যদি বৃষ্টিপাত দেখা দেয়, আবার সেন্ট্রিফিউগাল।
• টিস্যুর নমুনা- নমুনা কাটার পরে, ওজন পরীক্ষা করুন, PBS(PH7.2-7.4) যোগ করুন, তরল নাইট্রোজেন দিয়ে দ্রুত হিমায়িত করুন, গলে যাওয়ার পরে নমুনাগুলি 2-8℃ এ বজায় রাখুন, PBS(PH7.4) যোগ করুন, হাত বা গ্রাইন্ডার দ্বারা সমজাতীয়, সেন্ট্রিফিউগেশন 20-মিনিট 2000-3000 rpm গতিতে সুপারনাট্যান্ট অপসারণ করুন।
• নমুনা সংগ্রহের পরে যত তাড়াতাড়ি সম্ভব নির্যাস, এবং প্রাসঙ্গিক সাহিত্য অনুযায়ী, এবং নিষ্কাশনের পরে যত তাড়াতাড়ি সম্ভব পরীক্ষা করা উচিত।যদি তা না হয়, নমুনা সংরক্ষণের জন্য -20 ℃-এ রাখা যেতে পারে, বারবার জমাট-গলানো চক্র এড়িয়ে চলুন।
• NaN3 রয়েছে এমন নমুনা সনাক্ত করতে পারে না, কারণ NaN3 HRP সক্রিয়কে বাধা দেয়।

নীতি

এই ELISA কিট পদ্ধতি হিসাবে স্যান্ডউইচ-ELISA ব্যবহার করে।এই কিটে প্রদত্ত মাইক্রোইলিসা স্ট্রিপপ্লেটটি নির্দিষ্ট একটি অ্যান্টিবডি দিয়ে প্রি-কোটেড করা হয়েছেIL2R.মান বা নমুনাগুলি উপযুক্ত মাইক্রোইলিসা স্ট্রিপপ্লেট কূপে যোগ করা হয় এবং নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডির সাথে মিলিত হয়।তারপর একটি Horseradish Peroxidase (HRP)- এর জন্য নির্দিষ্ট কনজুগেটেড অ্যান্টিবডিIL2Rপ্রতিটি Microelisa stripplate ভালভাবে যোগ করা হয় এবং incubated.বিনামূল্যে উপাদান দূরে ধুয়ে হয়.প্রতিটি কূপে টিএমবি সাবস্ট্রেট দ্রবণ যোগ করা হয়।যে কূপ ধারণ করে শুধুIL2Rএবং এইচআরপি কনজুগেটেড থ্রম্বোমোডুলিন অ্যান্টিবডি নীল রঙের দেখাবে এবং তারপর স্টপ দ্রবণ যোগ করার পরে হলুদ হয়ে যাবে।অপটিক্যাল ঘনত্ব (OD) 450 nm তরঙ্গদৈর্ঘ্যে স্পেকট্রোফটোমেট্রিকভাবে পরিমাপ করা হয়।OD মান এর ঘনত্বের সমানুপাতিকIL2R.আপনি এর ঘনত্ব গণনা করতে পারেনIL2Rনমুনাগুলির OD-কে আদর্শ বক্ররেখার সাথে তুলনা করে।

মন্তব্য:

• প্রাপ্তির পর কিটটিকে 4°C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করুন৷ পরীক্ষা করার আগে কিটটিকে ঘরের তাপমাত্রায় সামঞ্জস্য করতে হবে৷IL2R অ্যান্টিবডি-কোটেড প্লেট থেকে অপ্রয়োজনীয় স্ট্রিপগুলি সরান, জিপ-লক ফয়েলে পুনরায় বন্ধ করুন এবং 4 ডিগ্রি সেলসিয়াসে রাখুন।
• ঘনীভূত ওয়াশিং বাফারে অবক্ষেপণ প্রদর্শিত হতে পারে।অনুগ্রহ করে সমস্ত অবক্ষেপ দ্রবীভূত করতে বাফারটি গরম করুন, যা ফলাফলগুলিকে প্রভাবিত করবে না।
• পরীক্ষামূলক ত্রুটি এড়াতে সঠিক পাইপেট ব্যবহার করা উচিত।5 মিনিটেরও কম সময়ে মাইক্রোপ্লেটে নমুনা যোগ করা উচিত।যদি প্রচুর সংখ্যক নমুনা অন্তর্ভুক্ত করা হয় তবে একাধিক চ্যানেল পাইপেট সুপারিশ করা হয়।
• স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখা প্রতিটি পরীক্ষায় অন্তর্ভুক্ত করা উচিত।প্রতিলিপি কূপ সুপারিশ করা হয়.যদি নমুনার OD মান মানদণ্ডের প্রথম কূপের চেয়ে বেশি হয়, অনুগ্রহ করে পরীক্ষার আগে নমুনা (n বার) পাতলা করুন।মূল থ্রম্বোমোডুলিন ঘনত্ব গণনা করার সময়, দয়া করে মোট তরল ফ্যাক্টর (XnX5) গুণ করুন।
• ক্রস-দূষণ এড়াতে, মাইক্রোপ্লেট সিলার শুধুমাত্র একবার ব্যবহারের জন্য।
• অনুগ্রহ করে সাবস্ট্রেটকে আলো থেকে দূরে রাখুন।
• সমস্ত অপারেশন কঠোরভাবে প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুযায়ী হওয়া উচিত।মাইক্রোটাইটার প্লেট রিডার দ্বারা নির্ধারিত ফলাফল।
• সমস্ত নমুনা, ওয়াশিং বাফার এবং বর্জ্যকে সংক্রামক এজেন্ট হিসাবে বিবেচনা করা উচিত।
• বিভিন্ন লট থেকে বিকারক মিশ্রিত করা উচিত নয়.