হিউম্যান থ্রম্বোমোডুলিন টিএম ফেটোমোডুলিন সিডি141 THBD THRM ELISA কিট

হিউম্যান থ্রম্বোমোডুলিন,টিএম,ফেটোমোডুলিন,সিডি141,টিএইচবিডি,টিএইচআরএম এলিসা কিট গবেষণা ব্যবহারের জন্য

হিউম্যান থ্রম্বোমোডুলিন,টিএম,ফেটোমোডুলিন,সিডি141,টিএইচবিডি,টিএইচআরএম এলিসা কিট

কিটের সাথে সরবরাহ করা সামগ্রী

নীতি

এই ELISA কিট পদ্ধতি হিসাবে স্যান্ডউইচ-ELISA ব্যবহার করে।এই কিটে প্রদত্ত মাইক্রোইলিসা স্ট্রিপপ্লেটটি থ্রম্বোমোডুলিনের জন্য নির্দিষ্ট একটি অ্যান্টিবডি দিয়ে প্রি-কোটেড করা হয়েছে।মান বা নমুনাগুলি উপযুক্ত মাইক্রোইলিসা স্ট্রিপপ্লেট কূপে যোগ করা হয় এবং নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডির সাথে মিলিত হয়।তারপর একটি Horseradish Peroxidase (HRP)- থ্রম্বোমোডুলিনের জন্য নির্দিষ্ট সংযোজিত অ্যান্টিবডি প্রতিটি মাইক্রোইলিসা স্ট্রিপ্লেটে ভালোভাবে যোগ করা হয় এবং ইনকিউব করা হয়।বিনামূল্যে উপাদান দূরে ধুয়ে হয়.প্রতিটি কূপে টিএমবি সাবস্ট্রেট দ্রবণ যোগ করা হয়।থ্রম্বোমোডুলিন এবং এইচআরপি কনজুগেটেড থ্রোম্বোমোডুলিন অ্যান্টিবডি ধারণ করে শুধুমাত্র সেই কূপগুলি নীল রঙের দেখাবে এবং তারপরে স্টপ দ্রবণ যোগ করার পরে হলুদ হয়ে যাবে।অপটিক্যাল ঘনত্ব (OD) 450 nm তরঙ্গদৈর্ঘ্যে স্পেকট্রোফটোমেট্রিকভাবে পরিমাপ করা হয়।OD মান থ্রম্বোমোডুলিনের ঘনত্বের সমানুপাতিক।আপনি আদর্শ বক্ররেখার সাথে নমুনার OD তুলনা করে নমুনায় থ্রম্বোমোডুলিনের ঘনত্ব গণনা করতে পারেন।

নমুনা প্রস্তুতি

1.সিরাম প্রস্তুতি

পুরো রক্ত ​​সংগ্রহের পর, রক্তকে ঘরের তাপমাত্রায় অব্যহত রেখে জমাট বাঁধতে দিন।এটি সাধারণত 10-20 মিনিট সময় নেয়।20 মিনিটের জন্য 2,000-3,000 rpm এ সেন্ট্রিফিউজিং করে ক্লটটি সরান।রিজার্ভেশনের সময় যদি অবক্ষয় দেখা দেয়, তাহলে নমুনাটি আবার সেন্ট্রিফিউগেট করা উচিত।

2.প্লাজমা প্রস্তুতি

অ্যান্টিকোয়াগুল্যান্ট (ইডিটিএ বা সাইট্রেট) সহ পুরো রক্ত ​​টিউবে সংগ্রহ করুন।ঘরের তাপমাত্রায় 10-20 মিনিটের জন্য ইনকিউব করার পর, টিউবগুলি 2000-3,000 rpm-এ 20 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউগেট করা হয়।প্লাজমা নমুনা হিসাবে সাবধানে সুপারনাট্যান্ট সংগ্রহ করুন।রিজার্ভেশনের সময় যদি অবক্ষয় দেখা দেয়, তাহলে নমুনাটি আবার সেন্ট্রিফিউগেট করা উচিত।

3.প্রস্রাবের নমুনা

অ্যাসেপটিক টিউবগুলিতে প্রস্রাব সংগ্রহ করুন।2,000-3,000 rpm এ 20 মিনিট সেন্ট্রিফিউজ করার পর সাবধানে সুপারনাট্যান্ট সংগ্রহ করুন।রিজার্ভেশনের সময় যদি অবক্ষয় দেখা দেয়, তাহলে নমুনাটি আবার সেন্ট্রিফিউগেট করা উচিত।সেরিব্রোস্পাইনাল ফ্লুইড এবং প্লুরোপেরিটোনিয়াল ফ্লুইড তৈরির পদ্ধতি প্রস্রাবের নমুনার মতোই।

4.কোষের নমুনা

আপনি যদি কোষের নিঃসরণ সনাক্ত করতে চান, কালচার সুপারনাট্যান্ট সংগ্রহ করুন অ্যাসেপটিক টিউবগুলিতে।2,000-3,000 rpm এ 20 মিনিট সেন্ট্রিফিউজ করার পর সাবধানে সুপারনাট্যান্ট সংগ্রহ করুন।আপনি যদি অন্তঃকোষীয় উপাদানগুলি সনাক্ত করতে চান তবে কোষগুলিকে 1X10 এ পাতলা করুন⁶PBS সহ /ml (pH 7.2-7.4)।বারবার হিমায়িত এবং গলানোর মাধ্যমে অন্তঃকোষীয় উপাদানগুলিকে ছেড়ে দেওয়ার জন্য কোষগুলিকে ধ্বংস করা হয়েছিল।2,000-3,000 rpm এ 20 মিনিট সেন্ট্রিফিউজ করার পর সাবধানে সুপারনাট্যান্ট সংগ্রহ করুন।রিজার্ভেশনের সময় যদি অবক্ষয় দেখা দেয়, তাহলে নমুনাটি আবার সেন্ট্রিফিউগেট করা উচিত।

5.টিস্যুর নমুনা

টিস্যুর নমুনা কাটা, ওজন করা, তরল নাইট্রোজেনে হিমায়িত করা হয় এবং ভবিষ্যতে ব্যবহারের জন্য -80℃ এ সংরক্ষণ করা হয়।পিবিএস (পিএইচ 7.4) যোগ করার পরে টিস্যু নমুনাগুলি একজাত করা হয়েছিল।নমুনাগুলি 4 ℃ এ পরিচালিত হওয়া উচিত।2,000-3,000 rpm এ 20 মিনিট সেন্ট্রিফিউজ করার পর সাবধানে সুপারনাট্যান্ট সংগ্রহ করুন।ELISA অ্যাস এবং ভবিষ্যতে ব্যবহারের জন্য সুপারনাট্যান্টকে অ্যালিকোট করুন।

মন্তব্য:

• নমুনা সংগ্রহের পরে যত তাড়াতাড়ি সম্ভব নমুনা নিষ্কাশন এবং ELISA পরীক্ষা করা উচিত।নমুনা প্রাসঙ্গিক সাহিত্য অনুযায়ী নিষ্কাশন করা উচিত.যদি ELISA অ্যাস অবিলম্বে সঞ্চালিত না হয়, নমুনাগুলি -20℃ এ সংরক্ষণ করা যেতে পারে। বারবার ফ্রিজ-থাও চক্র এড়ানো উচিত।
• আমাদের কিটগুলি NaN3 সহ নমুনার জন্য ব্যবহার করা যাবে না যা HRP-এর কার্যকলাপকে বাধা দিতে পারে।