কার্বোহাইড্রেট অ্যান্টিজেন ১৫৩ (CA153) টিউমার মার্কার

উদ্দেশ্যযুক্ত ব্যবহার

কার্বোহাইড্রেট অ্যান্টিজেন ১৫-৩ (CA153) (ELISA) সনাক্তকরণ কিট। এটি মানব সিরামে CA15-৩ এর পরিমাণগত পরীক্ষায় ব্যবহৃত হয়।

সংক্ষিপ্ত বিবরণ এবং ক্লিনিকাল গুরুত্ব

কার্বোহাইড্রেট অ্যান্টিজেন ১৫-৩ (সিএ১৫-৩) একটি গ্লাইকোপ্রোটিন, যা স্তন ক্যান্সার কোষের এমইউসি-১ এর একটি ইপিটোপ ফ্রেগমেন্ট। সিএ১৫-৩ বিভিন্ন ক্যান্সারে উপস্থিত রয়েছে, যেমন স্তন, ফুসফুস ক্যান্সার এবং ডিম্বাশয় ক্যান্সার.CA15- 3 স্তন ক্যান্সারের অগ্রগতি এবং মেটাস্ট্যাসিস নির্ণয় করতে এবং ক্লিনিকাল পরীক্ষার চিকিত্সা এবং ক্লিনিকাল রিসিভের জন্য ব্যবহৃত হয়।মেটাস্ট্যাটিক স্তন ক্যান্সারের ক্ষতগুলি বিবেচনা করা যেতে পারেযখন চিকিৎসা কার্যকর হয়, প্রায় 50% রোগীর CA15-3 ঘনত্ব উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পায়;৯৬% স্থানীয় পুনরাবৃত্তিতে সিএ১৫-৩ এর ঘনত্ব রেডিওলজিক্যাল এবং ক্লিনিকাল মানদণ্ডের চেয়ে বেশি সংবেদনশীলএই রিএজেন্টটি মূলত ক্যান্সার রোগীদের গতিশীল পর্যবেক্ষণের জন্য রোগের অগ্রগতি বা সহায়ক থেরাপিউটিক প্রভাব নির্ধারণের জন্য ব্যবহৃত হয় তবে এর ঘনত্ব টিউমারের আকারের সাথে সম্পর্কিত নয়,বৃদ্ধিকিছু মঙ্গলের রোগে (যেমন মঙ্গলের স্তন রোগ, সিরোসিস, হেপাটাইটিস ইত্যাদি) সূচকটি বিভিন্ন মাত্রায় বৃদ্ধি পেয়েছে।অতএব, CA15-3 কে ক্যান্সার স্ক্রিনিং, প্রাথমিক নির্ণয় এবং অন্যান্য উদ্দেশ্যে সাধারণ জনসংখ্যার জন্য একটি কার্যকর সাধারণ স্ক্রিনিং পরীক্ষা হিসাবে বিবেচনা করা উচিত নয়।

নীতি

সিএ১৫-৩ একটি স্যান্ডউইচ নীতি, এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোলজিক্যাল সর্বেন্ট টেস্ট ব্যবহার করে। সিরামে সিএ১৫-৩ স্তর পরিমাপ করার জন্য, কিটে সিএ১৫-৩ এর একক ক্লোনাল অ্যান্টিবডি দিয়ে আবৃত প্লাস্টিকের কূপ সরবরাহ করা হয়।রোগীর নমুনা যোগ করা হয় এবং, ইনকিউবেশন চলাকালীন, CA15-3, যদি উপস্থিত থাকে, তবে শক্ত পর্যায়ে অ্যান্টিবডিতে সংযুক্ত হয়, যখন HRP দিয়ে লেবেলযুক্ত একক অ্যান্টিবডি যোগ করা হয়, একটি HRP-অ্যান্টিবডি ¢CA15-3 ¢ অ্যান্টিবডি ¢ স্যান্ডউইচ ¢ তৈরি করে।যোগ করা টিএমবি সাবস্ট্র্যাট যোগ করার পরে, ফলাফলটি EIA প্লেট রিডার দ্বারা প্রাপ্ত হয়।

সরবরাহকৃত রিএজেন্ট

লেপযুক্ত মাইক্রোপ্লেট: 1 প্লেট (8 × 12 গর্ত), ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত। অ্যান্টি-সিএ 15-3 অ্যান্টিবডি দিয়ে আবৃত এবং একটি অ্যালুমিনিয়াম ব্যাগে সিল করা। খোলার পরে আর্দ্রতা থেকে রক্ষা করার জন্য পুনরায় সিলযোগ্য ব্যাগের স্ট্রিপগুলি একটি ডেসিকেন্ট দিয়ে সরান।মেয়াদ শেষ না হওয়া পর্যন্ত ২-৮°C এ সংরক্ষণ করুন.

এইচআরপি কনজিউগেট:11 মিলি, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত 1 টি থালা। এইচআরপি লেবেলযুক্ত অ্যান্টি-সিএ 15-3 এবং প্রোক্লিন -300 সংরক্ষণকারী রয়েছে। 2 ~ 8 ডিগ্রি সেলসিয়াসে মেয়াদ শেষ হওয়ার তারিখ পর্যন্ত সংরক্ষণ করুন।

নমুনা হ্রাস: ১ টি ১১ মিলি ভ্যালু, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত।

ক্যালিব্রেটর:৫ টি ০.৫ মিলি ভ্যালু, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত। S0 থেকে S4 এর সাথে লেবেলযুক্ত এবং CA-15-3 এর ঘনত্ব 0,15,40,100মেয়াদ শেষ না হওয়া পর্যন্ত ২-৮°C এ সংরক্ষণ করুন।

নিয়ন্ত্রণঃ১ টি ০.৫ মিলি ভ্যালু, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত। মেয়াদ শেষ হওয়ার তারিখ পর্যন্ত ২-৮ ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করুন। ঘনত্ব ৫৩-৯৮ ইউ/ মিলি।

ক্রোমোজেন এ:১ টি ৭ মিলি ভ্যালু, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত। H2O2 ধারণ করে। 2 ~ 8°C এ মেয়াদ শেষ না হওয়া পর্যন্ত সংরক্ষণ করুন।

ক্রোমোজেন বি:1 টি 7 মিলি ভ্যালু, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত। TMB ধারণ করে। মেয়াদ শেষ হওয়ার তারিখ পর্যন্ত 2 ~ 8°C এ সংরক্ষণ করুন।

থামুন সমাধানঃ১ টি ৭ মিলি ভ্যালু, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত। H2SO4 ধারণ করে। 2 ~ 8°C এ মেয়াদ শেষ না হওয়া পর্যন্ত সংরক্ষণ করুন।

ওয়াশ বাফারঃ15 মিলি, কনসেন্ট্রেট 20 বার, বিশ্লেষণের আগে ডি-ইওনিজড পানিতে দ্রবীভূত করুন। NaCl, ফসফেট এবং tween-20 ধারণ করে। 2 ~ 8 °C এ মেয়াদ শেষ হওয়ার তারিখ পর্যন্ত সংরক্ষণ করুন।

প্লেট সিলার:দুই টুকরা।

প্লাস্টিকের পুনরায় বন্ধযোগ্য ব্যাগ:এক সেট।

ব্যবহারের নির্দেশিকাঃএক কপি।

প্রস্তুতি

1সমস্ত নমুনা এবং রিএজেন্টগুলিকে ঘরের তাপমাত্রায় পৌঁছানোর অনুমতি দিন এবং ব্যবহারের আগে সাবধানে বিপরীতকরণের মাধ্যমে পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে মিশ্রিত করুন।

2. ওয়াশ বাফার প্রস্তুত করুন ওয়াশ কনসেন্ট্রেটকে ডি-ইওনিজড পানিতে ২০ গুণ পাতলা করে। পাতলা ওয়াশ সলিউশন কমপক্ষে এক সপ্তাহের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় স্থিতিশীল থাকে।

পরীক্ষার পদ্ধতিঃ

1.ব্যবহারের জন্য মাইক্রোটিট্রেশন স্ট্রিপগুলি চিহ্নিত করুন। সমস্ত ক্যালিব্রেটর এবং নিয়ন্ত্রণগুলি ডুপ্লিকেট সেট করা উচিত।

2.ক্যালিব্রেটর/কন্ট্রোলের 100 ইউল বিতরণ করুন। 100 ইউল নমুনা ডিলেশন এবং 10 ইউল নমুনা সংশ্লিষ্ট কূপগুলিতে বিতরণ করুন।

3.প্লেট সিলার দিয়ে স্ট্রিপগুলি কভার করুন। সমতল বেঞ্চে মাইক্রোটিটার প্লেটটি ঘুরিয়ে এটি নরমভাবে মিশ্রিত করুন। প্লেটটি 37 °C এ 0.5 ঘন্টা ইনকিউবেট করুন।

4.প্রতিটি গর্ত তিনবার, প্রতিবার ১০ সেকেন্ড ধুয়ে ফেলুন (ধোয়ার পদ্ধতি দেখুন) ।

5.প্রতিটি কূপের মধ্যে ১০০ ইউল এইচআরপিসি জঙ্গি প্রয়োগ করুন।

6.স্ট্রিপগুলিকে প্লেট সিলার দিয়ে ঢেকে ফেলুন। সমতল বেঞ্চে মাইক্রোটাইটার প্লেটটি ঘুরিয়ে দিয়ে এটি নরমভাবে মিশ্রিত করুন। প্লেটটি 37 °C এ 0.5 ঘন্টা ইনকিউবেট করুন।

7.প্রতিটি গর্ত ৩ বার, প্রতিবার ১০ সেকেন্ড ধুয়ে ফেলুন (ধোয়ার পদ্ধতি দেখুন) ।

8. ডিপ্রতিটি পুঁজায় ৫০ ইউল ক্রোমোজেন এটো প্রয়োগ করুন।

9.প্রতিটি গর্তে ৫০ ইউএল ক্রোমোজেন বি দিন।

10.স্ট্রিপগুলিকে একটি নতুন প্লেট সিলার দিয়ে ঢেকে রাখুন। মসৃণ বেঞ্চে মাইক্রোটাইটার প্লেটটি ঘুরিয়ে দিয়ে এটি নরমভাবে মিশ্রিত করুন। প্লেটটি 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 15 মিনিটের জন্য ইনকিউবেট করুন।

11প্রতিটি কূপের মধ্যে ৫০ ইউল স্টপিং সলিউশন ঢেলে সম্পূর্ণরূপে মিশিয়ে ফেলুন।

12১০ মিনিটের মধ্যে প্লেটের শোষণযোগ্যতা পড়ুন (পঠন পদ্ধতি দেখুন)

ব্যবহারকারীদের জন্য সতর্কতা

1. হ্যান্ডলিংয়ের জন্য মুখের মাধ্যমে কোনও পাইপেটিং নিষিদ্ধ করা উচিত। প্রতিটি নমুনার জন্য কেবলমাত্র একক ব্যবহারের টিপসযুক্ত পাইপেট ব্যবহার করুন।

2.বিভিন্ন মাস্টার লট থেকে উপাদান মিশ্রিত করবেন না।

3ব্যবহারের আগে সমস্ত উপকরণ ঘরের তাপমাত্রায় আনতে হবে।