রাট টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর আলফা এলিসা কিট

ভুট্টা টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর α,Cachectin,TNF,TNFSF2,TNF-α ELISA KIT

টিএনএফ আলফা ৪৮ ওয়েলসের জন্য র্যাট টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর আলফা ইলিসা কিট

কিটের সাথে সরবরাহিত উপাদান

নীতি

এই ELISA কিটে স্যান্ডউইচ-ELISA পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়েছে। এই কিটে দেওয়া Microelisa স্ট্রিপপ্লেটটি একটি বিশেষ অ্যান্টিবডি দিয়ে প্রাক-আচ্ছাদিত করা হয়েছেটিএনএফ-এ. স্ট্যান্ডার্ড বা নমুনাগুলি উপযুক্ত মাইক্রোলিসা স্ট্রিপলেট কূপগুলিতে যুক্ত করা হয় এবং নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডিতে একত্রিত করা হয়। তারপরে একটি হর্সেরিডস পারক্সাইডাস (এইচআরপি) - কনজগযুক্ত অ্যান্টিবডি নির্দিষ্টটিএনএফ-এপ্রতিটি মাইক্রোলিসা স্ট্রিপলেট ভাল এবং ইনকিউবেটেড যোগ করা হয়। বিনামূল্যে উপাদানগুলি ধুয়ে ফেলা হয়। টিএমবি সাবস্ট্র্যাট সমাধান প্রতিটি ভাল যোগ করা হয়। শুধুমাত্র সেই কূপগুলি যা ধারণ করেটিএনএফ-এএবং এইচআরপি সংযুক্ত থ্রম্বোমডুলিন অ্যান্টিবডি নীল রঙের প্রদর্শিত হবে এবং তারপর স্টপ সমাধান যোগ করার পরে হলুদ হয়ে যাবে।অপটিক্যাল ঘনত্ব (OD) 450 nm তরঙ্গদৈর্ঘ্যে বর্ণনাকারীভাবে পরিমাপ করা হয়OD মানটি OD এর ঘনত্বের সমানুপাতিক।টিএনএফ-এআপনি এর ঘনত্ব গণনা করতে পারেনটিএনএফ-এনমুনার ওডি-কে স্ট্যান্ডার্ড কার্ভের সাথে তুলনা করে।

নোটঃ

• প্রাপ্তির পরে কিটটি 4°C এ সংরক্ষণ করুন। পরীক্ষার আগে কিটটি ঘরের তাপমাত্রায় ভারসাম্যপূর্ণ করা উচিত। TNF-α অ্যান্টিবডি-প্রলিপ্ত প্লেট থেকে অপ্রয়োজনীয় স্ট্রিপগুলি সরান,জিপ-লক ফোলায় পুনরায় সিল করুন এবং 4°C এ রাখুন.
• ঘনীভূত ওয়াশিং বাফারে precipitates দেখা দিতে পারে। দয়া করে সমস্ত precipitates দ্রবীভূত করার জন্য বাফার গরম করুন, যা ফলাফল প্রভাবিত করবে না।
• পরীক্ষামূলক ত্রুটি এড়াতে সঠিক পাইপেট ব্যবহার করা উচিত। নমুনাগুলি 5 মিনিটেরও কম সময়ে মাইক্রোপ্লেটে যুক্ত করা উচিত। যদি অনেকগুলি নমুনা অন্তর্ভুক্ত করা হয়,মাল্টি চ্যানেল পাইপেটের পরামর্শ দেওয়া হয়.
• প্রতিটি পরীক্ষায় স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখা অন্তর্ভুক্ত করা উচিত। পুনরাবৃত্তি কূপগুলি সুপারিশ করা হয়। যদি নমুনার ওডি মানটি স্ট্যান্ডার্ডের প্রথম কূপের চেয়ে বেশি হয়,অনুগ্রহ করে পরীক্ষার আগে নমুনাটি (এন বার) দ্রবীভূত করুনথ্রম্বোমডুলিনের প্রাথমিক ঘনত্ব গণনা করার সময়, দয়া করে মোট ডিলেশন ফ্যাক্টর (এক্সএনএক্স) গুণ করুন।
• ক্রস-কন্টামিনেশন এড়ানোর জন্য, মাইক্রোপ্লেট সিলারগুলি শুধুমাত্র এককালীন ব্যবহারের জন্য।
• দয়া করে সাবস্ট্র্যাটকে আলোর কাছ থেকে দূরে রাখুন।
• সমস্ত অপারেশন কঠোরভাবে প্রস্তুতকারকের নির্দেশাবলী অনুযায়ী করা উচিত। Microtiter প্লেট রিডার দ্বারা নির্ধারিত ফলাফল।
• সমস্ত নমুনা, ওয়াশিং বাফার এবং বর্জ্য সংক্রামক এজেন্ট হিসাবে চিকিত্সা করা উচিত।
• বিভিন্ন লটের রিএজেন্ট মিশ্রিত করা উচিত নয়।

টিএনএফ-এ স্ট্যান্ডার্ডের পরিচিত ঘনত্ব এবং এর সংশ্লিষ্ট রিডিং ওডি যথাক্রমে লগ স্কেল (এক্স-অক্ষ) এবং লগ স্কেল (ওয়াই-অক্ষ) এ গ্রাফ করা হয়।নমুনায় টিএনএফ-এ এর ঘনত্ব নমুনার ০Y- অক্ষের উপর D। মূল ঘনত্ব হ্রাসের ফ্যাক্টরকে গুণ করে গণনা করা হয়।