Tnf আলফা 48 ওয়েলসের জন্য ইঁদুরের টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর আলফা এলিসা কিট

ইঁদুরের টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর α,Cachectin,TNF,TNFSF2,TNF-α ELISA KIT

কিটের সাথে সরবরাহ করা সামগ্রী

নীতি

এই ELISA কিট পদ্ধতি হিসাবে স্যান্ডউইচ-ELISA ব্যবহার করে।এই কিটে প্রদত্ত মাইক্রোইলিসা স্ট্রিপপ্লেটটি নির্দিষ্ট একটি অ্যান্টিবডি দিয়ে প্রি-কোটেড করা হয়েছেTNF-α.মান বা নমুনাগুলি উপযুক্ত মাইক্রোইলিসা স্ট্রিপপ্লেট কূপে যোগ করা হয় এবং নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডির সাথে মিলিত হয়।তারপর একটি Horseradish Peroxidase (HRP)- এর জন্য নির্দিষ্ট কনজুগেটেড অ্যান্টিবডিTNF-αপ্রতিটি Microelisa stripplate ভালভাবে যোগ করা হয় এবং incubated.বিনামূল্যে উপাদান দূরে ধুয়ে হয়.প্রতিটি কূপে টিএমবি সাবস্ট্রেট দ্রবণ যোগ করা হয়।যে কূপ ধারণ করে শুধুTNF-αএবং এইচআরপি কনজুগেটেড থ্রম্বোমোডুলিন অ্যান্টিবডি নীল রঙের দেখাবে এবং তারপর স্টপ দ্রবণ যোগ করার পরে হলুদ হয়ে যাবে।অপটিক্যাল ঘনত্ব (OD) 450 nm তরঙ্গদৈর্ঘ্যে স্পেকট্রোফটোমেট্রিকভাবে পরিমাপ করা হয়।OD মান এর ঘনত্বের সমানুপাতিকTNF-α.আপনি এর ঘনত্ব গণনা করতে পারেনTNF-αনমুনাগুলির OD-কে আদর্শ বক্ররেখার সাথে তুলনা করে।

মন্তব্য:

• প্রাপ্তির পর কিটটিকে 4°C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করুন৷ পরীক্ষা করার আগে কিটটিকে ঘরের তাপমাত্রায় সামঞ্জস্য করতে হবে৷TNF-α অ্যান্টিবডি-কোটেড প্লেট থেকে অপ্রয়োজনীয় স্ট্রিপগুলি সরান, জিপ-লক ফয়েলে পুনরায় বন্ধ করুন এবং 4 ডিগ্রি সেলসিয়াসে রাখুন।
• ঘনীভূত ওয়াশিং বাফারে অবক্ষেপণ প্রদর্শিত হতে পারে।অনুগ্রহ করে সমস্ত অবক্ষেপ দ্রবীভূত করতে বাফারটি গরম করুন, যা ফলাফলগুলিকে প্রভাবিত করবে না।
• পরীক্ষামূলক ত্রুটি এড়াতে সঠিক পাইপেট ব্যবহার করা উচিত।5 মিনিটেরও কম সময়ে মাইক্রোপ্লেটে নমুনা যোগ করা উচিত।যদি প্রচুর সংখ্যক নমুনা অন্তর্ভুক্ত করা হয় তবে একাধিক চ্যানেল পাইপেট সুপারিশ করা হয়।
• স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখা প্রতিটি পরীক্ষায় অন্তর্ভুক্ত করা উচিত।প্রতিলিপি কূপ সুপারিশ করা হয়.যদি নমুনার OD মান মানদণ্ডের প্রথম কূপের চেয়ে বেশি হয়, অনুগ্রহ করে পরীক্ষার আগে নমুনা (n বার) পাতলা করুন।মূল থ্রম্বোমোডুলিন ঘনত্ব গণনা করার সময়, দয়া করে মোট তরল ফ্যাক্টর (XnX5) গুণ করুন।
• ক্রস-দূষণ এড়াতে, মাইক্রোপ্লেট সিলার শুধুমাত্র একবার ব্যবহারের জন্য।
• অনুগ্রহ করে সাবস্ট্রেটকে আলো থেকে দূরে রাখুন।
• সমস্ত অপারেশন কঠোরভাবে প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুযায়ী হওয়া উচিত।মাইক্রোটাইটার প্লেট রিডার দ্বারা নির্ধারিত ফলাফল।
• সমস্ত নমুনা, ওয়াশিং বাফার এবং বর্জ্যকে সংক্রামক এজেন্ট হিসাবে বিবেচনা করা উচিত।
• বিভিন্ন লট থেকে বিকারক মিশ্রিত করা উচিত নয়.

TNF-a স্ট্যান্ডার্ডের পরিচিত ঘনত্ব এবং এর সংশ্লিষ্ট রিডিং OD যথাক্রমে লগ স্কেল (x-অক্ষ) এবং লগ স্কেল (y-অক্ষ) এ প্লট করা হয়েছে।নমুনায় TNF-a এর ঘনত্ব Y-অক্ষে নমুনার OD প্লট করার মাধ্যমে নির্ধারিত হয়।মূল ঘনত্ব তরল ফ্যাক্টরকে গুণ করে গণনা করা হয়।